[发明专利]一种基于叶绿体DNA差异的籼粳稻米种类荧光PCR快速检测鉴定方法在审
| 申请号： | 201911050790.3 | 申请日： | 2019-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN110669864A | 公开（公告）日： | 2020-01-10 |
| 发明（设计）人： | 陈文炳;邵碧英;缪婷玉;彭娟 | 申请（专利权）人： | 福州海关技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 35100 福州元创专利商标代理有限公司 | 代理人： | 饶文君;蔡学俊 |
| 地址： | 350003 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 粳稻 叶绿体DNA 荧光PCR 籼稻 熔解 稻米 荧光PCR检测 反向引物 快速检测 序列差异 正向引物 籼粳稻 扩增 | ||
【权利要求书】：
1.检测鉴定籼粳稻米种类的荧光PCR引物，其特征在于：所述引物的核苷酸序列为
正向引物F4：3’-AATCGCAACCCCTTTCCGC-5’，
反向引物R1：3’-TTGAGGATTATTCCATGATTCC-5’。
2.一种基于叶绿体DNA序列差异的籼粳稻米种类荧光PCR快速检测鉴定方法，其特征在于：以粳稻、籼稻的总DNA为模板，以F4/R1为引物，分别进行SYBR Green荧光PCR扩增；
PCR反应体系：2×SYBR Premix Ex Taq 12.5μL，引物F4/R1各0.5μL，200ng 总DNA 2μL，ddH2O补足至25μL；
反应条件：95℃ 30s；95℃ 5s，60℃34s，40个循环；65℃~95℃熔解曲线分析。
3.根据权利要求2所述的一种基于叶绿体DNA序列差异的籼粳稻米种类荧光PCR快速检测鉴定方法，其特征在于：SYBR Green荧光PCR扩增产物籼稻为135 bp、粳稻为204 bp片段，SYBR Green荧光PCR扩增熔解温度Tm为籼稻Tm值76.5℃，粳稻Tm值78.0℃，二者Tm值差为1.5；该熔解温度的差别，用于判别鉴定待测稻米所属的种类。
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