[发明专利]一种里氏木霉工程菌及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种里氏木霉工程菌，其特征在于：所述里氏木霉工程菌含有表达载体；

所述的表达载体含有里氏木霉组成型表达盒；

所述的里氏木霉工程菌的出发菌株为里氏木霉Trichoderma reesei QM9414；

所述的里氏木霉组成型表达盒由里氏木霉丙酮酸脱羧酶基因的组成型强启动子Ppdc、里氏木霉纤维二糖水解酶Ⅰ基因cbhⅠ的信号肽基因、外源目的基因内切葡聚糖酶基因egh31和里氏木霉丙酮酸脱羧酶基因终止子Tpdc组成，简称为Ppdc-cbhⅠ-egh31-Tpdc；

所述的内切葡聚糖酶基因egh31编码的氨基酸序列如下所示：

MLLAAATPARADTTICEPFGSTVIQGRYVVQNNRWGTGAPQCVTATDTGFRVIQADGSVPTDGAPKSYPSVFNGCHYTNCSPGTRLPARISTISSAPSSISYGYVPGGVYNAAYDIWLDPTPRTDGVNRTEIMIWFNRVGPVQPIGSPVATATVGGRTWEVWTGSNGTNDVISFVAPSTITSWSFDVMDFVDQAVNRGLAQRDWYLTSVQAGFEPWRDGVGLAVHSFSSTVNVGGDPGGPGGPGAPAPACQVV。

2.根据权利要求1所述的里氏木霉工程菌，其特征在于：

所述的里氏木霉纤维二糖水解酶Ⅰ基因cbhⅠ的信号肽基因的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示。

3.根据权利要求1所述的里氏木霉工程菌，其特征在于：所述表达载体的出发载体为pPICZαA。

4.根据权利要求1～3任一项所述的里氏木霉工程菌，其特征在于：所述的内切葡聚糖酶基因egh31的核苷酸序列如下所示：

ATGCTCCTCGCCGCCGCCACTCCCGCCCGGGCGGACACCACGATCTGCGAGCCCTTCGGGTCGACCGTGATCCAGGGCCGCTACGTCGTCCAGAACAACCGCTGGGGCACCGGCGCCCCCCAGTGCGTCACCGCGACGGACACCGGCTTCCGGGTCATCCAGGCCGACGGCTCGGTGCCCACCGACGGCGCTCCCAAGTCGTACCCGTCGGTCTTCAACGGCTGCCACTACACCAACTGTTCGCCCGGGACCAGGCTCCCCGCACGGATCAGCACCATCTCCAGCGCGCCCAGCAGCATCTCCTACGGCTACGTGCCGGGCGGTGTGTACAACGCCGCGTACGACATCTGGCTGGACCCGACGCCCCGCACCGACGGTGTCAACCGGACCGAGATCATGATCTGGTTCAACCGGGTCGGCCCGGTCCAGCCGATCGGCTCTCCGGTCGCCACCGCAACCGTCGGTGGGCGCACCTGGGAGGTGTGGACGGGCAGCAACGGCACCAACGACGTGATCTCCTTCGTCGCCCCGTCGACCATCACGAGCTGGAGCTTCGACGTCATGGACTTCGTCGACCAGGCCGTCAACCGGGGCCTGGCGCAGCGCGACTGGTACCTGACGAGCGTTCAGGCCGGCTTCGAACCGTGGCGGGACGGCGTCGGACTGGCGGTGCACTCCTTCTCCTCCACCGTGAACGTCGGCGGTGACCCCGGCGGGCCGGGCGGGCCGGGTGCCCCGGCGCCCGCCTGCCAGGTGGTGTAG。

5.权利要求1～3任一项所述的里氏木霉工程菌在制备工业酶制剂中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：

所述的工业酶制剂为中性内切葡聚糖酶tEgh31。