[发明专利]一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液

说明书

本发明公开了一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液，免疫磁珠洗液将表面活性剂、蛋白质、水溶性糖、无机盐、抑菌剂和缓冲液以特定比例混合。与常规磁珠洗液相比较，除了提高了清洗效果，还特异持续增菌，提高了阪崎肠杆菌的检出率。而且有效降低了食品基质的干扰，提高了免疫磁珠洗液的灵敏度，克服了常规磁珠洗液的缺陷，适合食品产业应用。

技术领域

本发明属于免疫技术领域，特别涉及一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液。

背景技术

阪崎肠杆菌是重要的食源性条件致病菌，主要污染在婴幼儿配方食品中。容易感染免疫力低下的婴幼儿，从而引起新生儿脑膜炎、坏死性结肠炎和菌血症等疾病，甚至能导致较高的致死率和严重的神经系统损伤后遗症，及发育障碍，从而受到广泛的关注。目前，传统方法不能够满足实际应用的快速检测以及准确的需求。

随着分子检测产品的不断涌现，检测灵敏度得到了提高，但检测结果很容易受到样品基质的影响，检测前样品前处理的重要性变得尤为突出。

在众多检测技术中，免疫磁珠法效果显著。免疫磁珠法是一种具有特异性的分离富集技术，在多个领域如DNA提取、蛋白纯化、细胞筛选、食源性致病微生物富集等，都有重要的应用价值。高品质的抗体资源对免疫磁珠特异性富集至关重要，但实际应用中，不同的食品基质如肉沫会干扰富集过程，造成免疫磁珠的回收率降低从而降低富集效果。因此在免疫富集操作过程中，需要使用免疫磁珠洗液清除食品杂质。但常规免疫磁珠洗液在实际应用中并没有起到很好的效果，肉沫等复杂食品样品富集时，会损失大量免疫磁珠，从而降低了目标菌的检出率。

根据现有技术的缺陷，研制一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液成为亟需解决的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液，以降低食品基质的干扰并提高阪崎肠杆菌的检出率。

为达到上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明第一个方面，提出了一种阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液。根据本发明的实施例，所述阪崎肠杆菌免疫磁珠洗液，其溶液为缓冲液，所述缓冲液中添加有表面活性剂、蛋白质、水溶性糖、无机盐、特异性抑菌剂，其中特异性抑菌剂可以抑制样品中的非目标菌生长。根据本发明的实施例效果，可提高了洗液的清洗效果，并且有效降低了食品基质的干扰，而且具有特异持续性增菌的功效，尤其是目标菌含量极低的样品增菌效果显著，从而提高了阪崎肠杆菌的检出率。

根据本发明的实施例，其溶液为缓冲液，所述缓冲液中添加有0.2～1.4g/L表面活性剂、2.0～3.0g/L无机盐、6～50g/L蛋白质、7～11g/L水溶性糖和14.5～22.5mg/L特异性抑菌剂。

根据本发明的实施例，所述表面活性剂选自Tween-20、TritonX-100、OHODASURFON-870中的至少一种；

所述蛋白质选自胰蛋白胨、牛血清白蛋白、乳白蛋白中的至少一种；

所述水溶性糖选自乳糖；

所述无机盐选自NaCl、KCl的至少一种；

所述特异性抑菌剂为新生霉素钠、万古霉素的至少一种。

根据本发明的实施例，所述洗液的pH＝7.0～7.5，其溶液为缓冲液，所述缓冲液中添加有7～11g/L乳糖、20～30g/L胰蛋白胨、6～9g/L牛血清白蛋白、7～11g/L乳白蛋白、2.0～3.0g/L NaCl、6.5～10.5mg/L万古霉素、8.0～12.0mg/L新生霉素钠、0.60～0.70g/LTween-20、0.20～0.30g/L TritonX-100、0.30～0.40g/L OHODASURF ON-870。发明人发现，质量比在上述范围内时，增菌和清洗效果更显著。为了进一步效果，发明人进行了进一步优化，惊喜地发现，配比效果大大增强，在上述范围内时，增菌和清洗效果更佳显著。