[发明专利]一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液

说明书

本发明公开了一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液，将表面活性剂、蛋白质、水溶性糖、无机盐、抑菌剂以特定比例混合，溶剂为缓冲液。与常规磁珠洗液相比较，除了提高了清洗效果，还特异持续增菌，提高了大肠杆菌O157的检出率。而且有效降低了食品基质的干扰，提高了免疫磁珠洗液的灵敏度，克服了常规磁珠洗液的缺陷。

技术领域

本发明属于免疫技术领域，特别涉及一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液。

背景技术

大肠杆菌O157:H7是肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)中较为显著的血清型菌株，大肠杆菌O157:H7的感染剂量极小(仅为10个菌)。感染后的病人可能会出现腹泻等症状，进一步发展为出血性结肠炎，病情发展极快，致死率高，给社会和大众健康造成严重伤害。

食源性的EHEC感染中，肉类及其制品、牛奶、水果及其制品等均可受到污染，在常规的大肠杆菌检测中，难以检测到此病原菌，为了提高检测率，不断有分子检测产品的涌现，灵敏度得到了提高，但检测结果更容易受到样品基质的影响，检测前样品前处理的重要性变得尤为突出。

众多检测技术中，免疫磁珠法效果显著。免疫磁珠法是一种具有特异性的分离富集技术，在多个领域如DNA提取、蛋白纯化、细胞筛选、食源性致病微生物富集等，都有重要的应用价值。高品质的抗体资源对免疫磁珠特异性富集至关重要，但实际应用中，不同的食品基质如肉沫会干扰富集过程，造成免疫磁珠的回收率降低从而降低富集效果。因此在免疫富集操作过程中，需要使用免疫磁珠洗液清除食品杂质。但常规免疫磁珠洗液并没有起到很好的效果。尤其是对肉沫样品进行富集，损失了大量免疫磁珠，从而降低了目标菌的检出率。而且还降低了清洗效果，增加了其他病原菌，使得清洗过程不能达到实验要求。

根据现有技术的缺陷，研制一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液成为亟需解决的问题。

发明内容

本发明的首要目的在于提供一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液，以降低食品基质的干扰并提高大肠杆菌O157的检出率。

为达到上述目的，本发明所采取的技术方案是：

本发明第一个方面，提出了一种大肠杆菌O157免疫磁珠洗液。根据本发明的实施例，大肠杆菌O157免疫磁珠洗液，其溶液为缓冲液，所述缓冲液中添加有表面活性剂、蛋白质、水溶性糖、无机盐、特异性抑菌剂，其中特异性抑菌剂可以抑制样品中的非目标菌生长。根据本发明的实施例，可提高了洗液的清洗效果，并且有效降低了食品基质的干扰，而且具有特异持续性增菌的功效，尤其是目标菌含量极低的样品增菌效果显著，从而提高了大肠杆菌O157的检出率。

根据本发明的实施例，其溶液为缓冲液，所述缓冲液中添加有0.2～1.45g/L表面活性剂、0.5～0.7g/L无机盐、4.8～33.9g/L蛋白质、5.0～6.5g/L水溶性糖、0.003～1.017g/L特异性抑菌剂。

根据本发明的实施例，

所述表面活性剂选自Tween-20、TritonX-100、OHODASURF ON-870中的至少一种；

所述蛋白质选自胰蛋白胨、酪蛋白钠、乳白蛋白中的至少一种；

所述水溶性糖选自乳糖；

所述无机盐选自NaCl、KCl的至少一种；

所述特异性抑菌剂选自新生霉素钠、胆盐。