[发明专利]KFS相关基因突变在制备检测试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了与KFS相关的KMT2D基因的3个突变位点，并提供检测KMT2D易感SNP位点基因型的试剂在制备KFS检测的试剂盒中的应用。进一步，本发明公开了一种用于检测与KFS相关基因突变的试剂。本发明筛选了3个与KFS相关的易感SNP位点，并提供其在KFS诊断中的应用，阐述SNP对于KFS进展的影响，揭示其在诊断、治疗中价值。因此，本发明可开发出利用SNP基因型对KFS早期诊断的试剂盒和生物制剂，不仅能够快速有效的做到早期诊断，其精确度大大提高，而且为基因治疗、药物治疗等临床应用提供了治疗靶点和重要依据。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及KFS相关基因突变在制备检测试剂盒中的应用。

背景技术

先天性颈椎融合畸形(Klippel-Feil Syndrome，KFS)是一种先天性的颈椎椎体发育畸形，发病率约为1/40000-1/42000，其临床典型特点为：颈部短粗、后发际低、颈部活动受限；但只有不到50％的患者同时具有三项表现。

KFS多合并多种先天性疾病和其他系统畸形，患者的神经压迫症状从神经根病到四肢麻痹、死亡等均可出现，还可造成严重的身心问题，给家庭和社会造成极大负担。

目前，因缺乏早期预测手段，KFS患者多在出现颈椎严重畸形时才被发现，治疗方法仅能通过支具或手术矫形来控制颈椎畸形的进展，但对其他系统畸形病变无法改善。因此，探索早期预测、诊断方法和病因治疗靶点是当前KFS的研究热点。但目前KFS病因未明，近年的研究表明KFS的病因可能与基因突变、环境因素以及发育异常相关，其中尤以基因突变最为密切。基因突变在KFS的发生、发展过程中起着非常重要的作用。

发明内容

本发明的目的是针对解决上述技术问题，提出一种用于KFS疾病早期诊断的标志物及其在制备产品中应用。

本发明的第二目的是提供检测KMT2D易感SNP位点基因型的试剂在制备KFS检测的试剂盒中的应用。

本发明的第三个目的是提供一种用于检测与KFS相关基因突变的生物制剂。

发明人收集KFS患者血液样本通过全外显子水平寻找基因的致病性突变，并通过小量样本进行基因型验证，进一步证实新突变是有害的，可以作为KFS诊断标志物，为预测疾病发展和指导临床早期干预提供理论依据，早日实现KFS的个体化早期诊断和治疗。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

本发明首先提供了检测KMT2D易感SNP位点基因型的试剂在制备KFS检测的试剂盒中的应用，所述KMT2D基因携带3个易感SNP位点，所述SNP位点分别为：

人类第12号染色体第49425124位碱基由G到A的突变，具体信息为：NM_003482.3:c.13364GA(p.Arg4455His)；

人类第12号染色体第49444297位碱基由C到T的突变，具体信息为：NM_003482.3:c.3074CT(p.Ser1025Leu)；

人类第12号染色体第49432200位碱基由C到T的突变，具体信息为：

NM_003482.3:c.8939CT(p.Ala2980Val)。

优选的，所述试剂盒包括用于扩增所述SNP位点的引物对。

优选的，所述试剂盒包括用于扩增所述SNP位点的引物对和限制性内切酶。

优选的，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1-6所示。

优选的，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq酶、Mg²⁺和PCR反应缓冲液。