[发明专利]一种野菊花药材质量评价方法及应用

说明书

本发明涉及一种野菊花药材质量评价方法及应用，首先构建野菊花药材的指纹图谱，通过模式识别法对指纹图谱进行分析，结合一测多评全面反映野菊花药材中多成分的定性定量信息；首先制备混合对照品溶液、供试品溶液，然后采用高效液相色谱对混合对照品溶液和供试品溶液分别检测，并记录混合对照品溶液和供试品溶液的指纹图谱，再通过一测多评法记录12种成分的峰面积，计算相对校正因子，用校正因子计算12种组份的含量。本发明中高效液相色谱法同时测定野菊花中12种组份含量，操作简便，重现性好，快速准确实现了野菊花中多指标成分同时定量，12种组份分离度好，为野菊花质量控制奠定理论基础。

技术领域

本发明涉及药材质量检测领域，尤其涉及一种野菊花药材质量评价方法及应用。

背景技术

野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum indicum L.的干燥头状花序，秋、冬二季花初开放时采摘，晒干，或蒸后晒干，具疏散风热、消肿解毒的功效，用于治疗疔疮痈肿、咽喉肿痛、风火赤眼、头痛眩晕等病证，有机酸和黄酮类化合物在野菊花药材中含量高，具有抗炎、抗氧化、抗菌等活性，其中咖啡酰奎尼酸类结构相似，同分异构化合物较多，对照品昂贵，野菊花临床应用广泛，资源丰富，分布全国多个省份，生长环境差异显著，成分复杂，质量控制及质量评价工作困难重重。

现有技术中指纹图谱能全面反映中药材的化学成分信息，有完整性和模糊性两大属性，其模糊性致使其缺乏准确的定性定量数据支撑，具有一定的局限性；含量测定尤其是多指标含量测定在一定程度上弥补指纹图谱法对于中药质量评价的不足及单一成分含量测定对质量评价的局限性，传统色谱峰指认需要大量对照品做参照，指认色谱峰越多对照品需求量越大，研究成本高，外标法含量测定离不开对照品，且要求对照品纯度高，结构相似的对照品如咖啡酰奎宁酸类化合物分离提纯难，价格昂贵，严重阻碍色谱峰指认及多指标含量测定。

而一测多评含量测定法借助易得价廉的单一对照品，利用相对校正因子可实现多指标成分的同时定量，相对保留值可准确指认、定位待测色谱峰；野菊花产地广泛，主成分分析、聚类分析等模式识别方法对于分析不同产地野菊花药材之间差异，通过产地间聚类趋势，可直观体现野菊花药材产地信息及预测野菊花药材产地归属。

发明内容

本发明通过构建野菊花药材HPLC指纹图谱，建立对照指纹图谱，分析21批不同产地野菊花药材指纹图谱的相似度，借助主成分分析、聚类分析模式识别法对21个不同产地的野菊花药材指纹图谱数据进行分析，结合一测多评法全面反映野菊花药材中12种成分的定性定量信息，以解决背景技术存在的问题。

为实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

一种野菊花药材质量评价方法，包括指纹图谱法和模式识别法，还包括一测多评法，构建野菊花药材的指纹图谱，模式识别法分析不同产地野菊花药材聚类趋势，以绿原酸为内参物，一测多评法明确野菊花药材指纹图谱中12个特征组分位置及含量；所述野菊花药材指纹图谱中12个特征组分为5-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、4,5-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷、木犀草素、芹菜素、金合欢素；

构建野菊花药材的指纹图谱，包括以下步骤：

步骤(1)制备混合对照品溶液：分别称取5-咖啡酰奎宁酸、绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、4,5-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、蒙花苷、木犀草素、芹菜素、金合欢素适量，加溶剂溶解，制得混合对照品原液，然后精密量取1、2、4、6、8、10mL混合对照品原液于10mL棕色量瓶中，用上述溶剂定容至刻度，混合均匀，得到系列浓度混合对照品溶液，4℃避光存储；

步骤(2)制备供试品溶液：取不同产地的野菊花药材粉末0.25g，称定，置具塞锥形瓶中，加入溶剂100ml，称定重量，回流1～3小时，再称定重量，用上述溶剂补足减失的重量，摇匀，过0.45μm滤膜，置于1.5mL进样小瓶，备测；