[发明专利]一种脑脱细胞支架的制备方法

权利要求书

1.一种脑脱细胞支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）采用去污剂浸泡漂洗法获得脑脱细胞支架作为细胞载体；（2）对步骤（1）脑脱细胞支架的预血管化，得到预血管化的脑脱细胞支架；具体的，在步骤（2）中，将HUVECs种植到步骤（1）所得到的脑脱细胞支架中，并使其过表达VEGF，将其移植到SD大鼠腹部皮下，经HE、CD31染色证实支架中有血管形成；（3）将PC12细胞移植到步骤（2）所制备的预血管化的支架中，验证预血管化的脑脱细胞支架中血管网络的形成，在组织工程中对种子细胞移植的重要性。

2.根据权利要求1所述的一种脑脱细胞支架的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）具体包括以下过程：取300-400g SD大鼠，复合麻醉剂腹腔麻醉成功后打开胸腹腔，充分暴露心脏后从心尖端进针经左心室插入升主动脉，并用止血钳固定，随后剪开右心耳，灌注0.9%氯化钠注射液约300 mL ，至右心耳流出无色液体后停止灌注，断头取出脑组织，去除非中枢神经系统组织后将脑组织放入玻璃皿中，脱色摇床上完成脱细胞：1%TritonX-100+0.1%氨水漂洗，速度：80rpm/min，液体浑浊后更换液体，至脱细胞支架成无色透明为止；PBS漂洗：3次×5min/次；DNA酶处理3次×30min/次；PBS漂洗：3次×5min/次；将脱细胞支架置于4℃PBS中保存备用。

3.根据权利要求1所述的一种脑脱细胞支架的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）具体包括以下过程：将PC12细胞移植到预血管化的支架中，作为实验组；并以未经步骤（2）预血管化的脑脱细胞支架作为对照组，经PC12细胞在预血管化支架中存活时间与在对照组时间进行比较。