[发明专利]样本裂解和PCR反应组合物有效
| 申请号: | 201910954105.3 | 申请日: | 2019-10-09 |
| 公开(公告)号: | CN112301097B | 公开(公告)日: | 2022-10-21 |
| 发明(设计)人: | 韩巧玲;徐强;崔相民 | 申请(专利权)人: | 申翌生物科技(杭州)有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806;C12Q1/686 |
| 代理公司: | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人: | 刘娜 |
| 地址: | 311121 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 样本 裂解 pcr 反应 组合 | ||
1.一种PCR反应系统,其特征在于,包括:
样本容纳单元,所述样本容纳单元内设置有裂解原料冻干粉,并且所述样本容纳单元具有第一液体出/入口;
稀释液容纳单元,所述稀释液容纳单元内设置有稀释液,并且所述稀释液容纳单元具有稀释液出口;
PCR反应单元,所述PCR反应单元内设置有反转录酶和PCR原料冻干粉,并且所述PCR反应单元具有PCR反应液出口和裂解后的样本混合液入口;以及
活塞单元,所述活塞单元包括注射室和活塞,所述注射室具有第二液体出/入口;
所述第二液体出/入口通过第一管路与所述第一液体出/入口相连,
所述第二液体出/入口通过第二管路与所述稀释液出口相连,
所述第二液体出/入口通过第三管路与所述裂解后的样本混合液入口相连,
所述PCR反应液出口通过第四管路与所述稀释液出口相连;
所述PCR反应系统的使用方法包括:
拉动所述活塞,使所述稀释液容纳单元的稀释液进入至所述注射室;
往返移动所述活塞,使所述注射室中的部分稀释液进入至所述样本容纳单元,以便使所述稀释液与样本以及所述裂解原料冻干粉进行混合,并进行裂解;
再次拉动所述活塞,使所述样本容纳单元中已裂解的样本混合液进入所述注射室;
再次往返移动所述活塞,使所述注射室的所述已裂解的样本混合液进入至所述稀释液容纳单元,所述已裂解的样本混合液与所述稀释液容纳单元中剩余的稀释液混合;
继续拉动所述活塞,使所述稀释液容纳单元中稀释后的样本混合液进入至所述注射室;
继续往返移动所述活塞,使所述注射室中所述稀释后的样本混合液进入所述PCR反应单元,所述稀释后的样本混合液与所述反转录酶以及PCR原料的冻干粉混合,并进行PCR扩增反应;其中:
所述裂解原料冻干粉包括金属离子螯合剂、十二烷基硫酸钠、皂苷、蛋白酶K、聚乙二醇3350、Tris-HCl和水;
所述反转录酶和PCR原料冻干粉包括甘露醇,蔗糖,氯化盐,牛血清白蛋白,dNTP,聚氧乙烯十二烷醚,HEPES,DNA聚合酶,反转录酶和RNA酶抑制剂,水。
2.根据权利要求1所述的PCR反应系统,其特征在于,所述金属离子螯合剂为EDTA和EGTA。
3.根据权利要求1所述的PCR反应系统,其特征在于,所述氯化盐为氯化钾和氯化镁。
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