[发明专利]一种坯革综合毒性的检测方法

说明书

一种用发光细菌检测坯革综合毒性的方法，是以浓度低于2.5%wt NaCl溶液作为浸提剂，浸提坯革中弱结合的化学物质，获得坯革浸提液。在浸提液中加入NaCl，使其浓度为2.5%wt，调节pH 7.0；或用2.5%wt NaCl溶液，稀释浸提液为适宜的浓度梯度，并调节pH 7.0；为毒性测定样品。取培养后的发光细菌，加入样品液，混匀后静置，测定发光强度。样品毒性的表达：以2.5%wt NaCl溶液为空白，测量静置后混合液的相对发光强度、半数相对发光强度浓度ECsubgt;50/subgt;。本发明以氯化钠溶液为浸提剂，浸提坯革样品中的毒性物质，用毒性检测仪直接检测浸提液的综合毒性，构建了一种坯革综合毒性检测的便捷方法，规避了传统方法的不足。

技术领域

本发明涉及发光细菌的综合毒性检测方法领域，具体涉及一种基于发光细菌的坯革综合毒性检测方法。

背景技术

生皮经前处理、鞣制、染整和涂饰工段后，制备为成革，而经鞣制尚未涂饰的革称为坯革。坯革中含有多种化学物质，如铬、醛、酚类、表面活性剂、树脂类等物质，这些物质可能在加工、使用过程及废弃后溢出，成为危害健康和环境生态的污染物。这些污染物不仅各有其毒性，而且各种污染物质混合、相互作用也会产生潜在的毒性。文献“Investigationinto the hazards of finished Cr-tanned leather as both product and waste”（Peng LQ ,Li Y, Han WM, Long WJ , Zhang WH,. Shi B. Journal of the Society ofLeather Technologists and Chemists,2019(103):43-48）报道了用去离子水模拟雨水，渗滤铬鞣成革对发光细菌的生态毒性，提出综合毒性是对成革生态性评价必不可少的补充。

现有关于皮革生态性的检测技术，局限于成革中部分有害成分如HCHO、Cr⁶⁺的含量测定，针对每一种有害成分，萃取方式各异。例如GB/T19941-2005采用十二烷基磺酸钠溶液，萃取皮革中游离甲醛；GB/T22807-2008采用磷酸氢二钾缓冲溶液，萃取皮革中六价铬。QB/T2721-2005采用蒸馏水萃取皮革2 h，其目的是去除过量吸附的水溶性皮革化学品，未考虑弱结合（如静电、氢键作用）化学品的萃取。实际上，在环境光照及温度、湿度、pH变化下，皮革中弱结合的化学品进一步转化和释放的风险增大，而采用不同类鞣剂鞣制的坯革，表面电荷甚至有电性差异，与复鞣、染色等化学品结合的方式各异。针对坯革有害物质的浸出技术，尚未见报道。

我国是皮革生产的大国，制革过程产生原皮重30%左右的坯革革屑废弃物。但目前世界各国针对废弃物的生态毒性的特性鉴别，尚处于起步阶段，特性鉴别包括浸提和生物测试。生物测试的受试生物包括大鼠、小鼠等哺乳动物，以及鱼、水蚤和藻类，其缺陷是只有专业分析测试机构才具备测试条件，检测样品的周期相对较长，检测过程复杂，检测成本较高，不适合生产过程控制生态性的快速和简便的需要。

我国是皮革生产、消费和出口大国，建立准确可靠、灵敏度高的坯革污染物检测技术，从整体上提高我国制革行业环境中污染物综合毒性检测能力，为我国绿色制革化学品和清洁工艺的研发提供重要的理论依据以及指导意见，保证皮革制品的质量安全和避免国际间的贸易争端，具有非常重要的理论和实践意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的只检测单一污染物、而综合毒性筛查操作复杂、时间长、检测成本较高的缺点，提供一种基于发光细菌的操作易控、经济实用的坯革毒性检测方法。

本发明提供了一种基于发光细菌的坯革综合毒性检测方法之一，包括以下步骤：

（1）预处理：对坯革取样干燥，恒温恒湿后，进行粉碎；

（2）浸提：将预处理后的坯革加入浸提剂，恒温水平震荡一定时间，过滤得浸提液；