[发明专利]生产O-乙酰基高丝氨酸的微生物和用其生产O-乙酰基高丝氨酸的方法

权利要求书

1.生产L-甲硫氨酸方法，包括：

(a)培养埃希氏菌属(Escherichia sp.)的微生物，生成O-乙酰基高丝氨酸，其中所述微生物的柠檬酸合酶的内源活性减弱或失活；和

(b)使步骤(a)中生成的O-乙酰基高丝氨酸与O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶或具有O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶的微生物接触。

2.根据权利要求1所述的方法，其中柠檬酸合酶内源活性减弱的所述微生物具有由SEQID NO：1或SEQ ID NO：2表示的氨基酸序列。

3.根据权利要求1所述的方法，其中(a)的微生物进一步具有与其内源活性相比减弱或失活的胱硫醚γ合酶、高丝氨酸激酶或两者的活性。

4.根据权利要求1所述的方法，其中(a)的微生物进一步具有引入或增强的高丝氨酸O-乙酰基转移酶活性，或具有内源高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶，所述内源高丝氨酸O-琥珀酰基转移酶被进一步修饰成与SEQ ID NO：16具有95％或以上同一性的多肽并且进一步具有在G111E位和L112T或L112H位的突变以具有高丝氨酸O-乙酰基转移酶活性。

5.根据权利要求1所述的方法，其中(a)的微生物进一步具有引入或增强的至少一种蛋白质的活性，所述至少一种蛋白质选自磷酸烯醇丙酮酸羧化酶、天冬氨酸氨基转移酶和天冬氨酸半醛脱氢酶。

6.根据权利要求1所述的方法，其中(a)的微生物是大肠杆菌(Escherichia coli)。

7.根据权利要求1所述的方法，其中O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶衍生自钩端螺旋体属(Leptospira sp.)、色杆菌属(Chromobacterium sp.)、或生丝单胞菌属(Hyphomonassp.)。

8.根据权利要求1所述的方法，进一步包括在步骤(b)中加入甲基硫醇作为底物。

9.根据权利要求1所述的方法，进一步包括回收步骤(a)中生成的O-乙酰基高丝氨酸。

10.根据权利要求1所述的方法，进一步包括回收步骤(b)中生成的L-甲硫氨酸。