[发明专利]一种快速检测润楠叶枯病的引物、试剂盒和检测方法在审
| 申请号： | 201910914666.0 | 申请日： | 2019-09-26 |
| 公开（公告）号： | CN110468233A | 公开（公告）日： | 2019-11-19 |
| 发明（设计）人： | 韩珊;汪昱伶;朱天辉;李姝江;谯天敏;王明;姜耀荣;衣建民;李砚钺 | 申请（专利权）人： | 四川农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/6848;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 51229 成都正华专利代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 肖芳<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 625000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物 快速检测 叶片DNA 检测扩增产物 最佳防治时期 盘多毛孢菌 扩增条带 有效解决 巢式PCR 传统的 试剂盒 叶枯病 耗材 叶片 耗时 诊断 检测 | ||
【权利要求书】：
1.一种快速检测润楠叶枯病的引物，其特征在于，所述引物序列为：F：5’-GAACTTACCATTGTTGCCTCG-3’，R：5’-CGCCGTTGTATTTCAGGAG-3’。
2.采用权利要求1所述引物快速检测润楠叶枯病的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取润楠叶片DNA；
(2)以润楠叶片DNA为模板，采用权利要求1所述的引物进行巢式PCR反应；
(3)检测扩增产物，当PCR产物呈现578bp的扩增条带时，即表明叶片中含有致其叶枯病的小孢拟盘多毛孢菌。
3.如权利要求2所述的快速检测润楠叶枯病的方法，其特征在于，步骤(2)中巢式PCR扩增体系25μL包括：DNA模板1μL，上下游引物各1μL，TaqDNA聚合酶22μL。
4.如权利要求2所述的快速检测润楠叶枯病的方法，其特征在于，步骤(2)中扩增程序：98℃预变性2min，98℃变性10s，63℃退火10s，72℃延伸20s，共34个循环，72℃延伸2min。
5.一种快速检测润楠叶枯病的试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1所述的引物、润楠叶片DNA提取试剂盒和TaqDNA聚合酶。
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