[发明专利]一种采用模拟移动床色谱提取甜菊糖苷的方法

说明书

一种采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：1)叶片处理；2)蒸馏浓缩粗提液；3)用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩粗提液中的甜菊糖苷；4)将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。本发明的利用模拟移动床提取甜菊糖苷的方法，使得总苷含量高于97％，甜菊糖苷A含量高于70％，提纯效果显著。

技术领域

本发明涉及天然植物有效组分的提纯方法，尤其涉及一种采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法。

背景技术

甜叶菊(stevia rebaudiana)别名甜菊﹑糖草，属菊科(Compositae),斯台维亚属，原产地在南美亚热带地区。我国自1976年开始由南京中山植物园、中国农业科学院等科研单位先后从日本引进甜叶菊试种成功。甜叶菊含有14种微量元素、32种营养成分，在体内不代谢、不蓄积、不致癌、无毒性，其安全性已得到国际FAO和WHO以及美国FAD等组织的认可，因此它既是极好的糖源，又是良好的营养来源。

甜叶菊糖苷，简称甜菊苷，是从干燥后的甜叶菊叶片中提取出来的一类具甜味的萜烯类配糖体，主要包含8种具有不同甜度的糖苷。甜菊苷具有高甜度(为蔗糖的200-300倍)、低热量(仅为蔗糖的1/300)的特性，长期食用不会使人发胖，特别适宜肥胖病、糖尿病、高血压、动脉硬化、龋齿病患者使用，而且物理、化学性能稳定、无发酵性，可延长甜叶菊糖苷制品的保质期。因而日益引起人们的关注和重视，被广泛应用在食品和药物行业中，被誉为继蔗糖、甜菜糖之后的第三种天然糖源，是最有发展前途的新糖源。

目前从甜叶菊中提取甜菊糖苷的一般工艺包括：甜叶菊水浸提取、粗滤、絮凝剂除杂、精滤、柱层析纯化、浓缩干燥和结晶等过程。在这些过程中，水浸泡提取时耗水量大，需要蒸水浓缩，能耗高；絮凝剂除杂时，在浸出液中加入絮凝剂后产生大量沉淀，虽然能除去大部分杂质，但也会吸附一部分甜菊糖苷，降低产品收率，同时又产生大量盐；柱层析纯化为该工艺的关键步骤，除了去除甜菊糖苷提取液中残留的少量色素、鞣质和其它糖类，还能脱盐等杂质，但树脂和流动相用量大，树脂利用率低，而且树脂需要再生，脱盐、脱色树脂再生周期一般很长，而且产生大量废水。

因此，有必要对甜菊糖苷的提取方法进行改进。

发明内容

基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，其过程简单，条件温和，提取率高。

本发明的目的是通过如下的方案实现的：

一种采用模拟移动床色谱技术提取甜菊糖苷的方法，包括如下步骤：

叶片处理，将甜叶菊叶片剔除杂质和色泽灰暗后，真空冷冻干燥，粉碎、过筛子，得到甜叶菊粉末，将甜叶菊粉末转入到超高压反应器中，按照料液比1：4-1：8加入水，室温下在700-1000MPa下，保压时间30-45分钟浸泡，卸压，经过滤，离心或抽滤得到提取液，重复操作，合并两次滤液即得到甜菊糖苷的粗提液；

蒸馏浓缩粗提液；

用模拟移动床色谱分离甜菊糖苷浓缩粗提液中的甜菊糖苷，模拟移动床色谱的固定相采用C18硅胶，流动相采用乙醇与水、甲酸、异丙醇的混合溶液，混合溶液中按体积百分计：乙醇：30-60％，甲酸：0-2％，异丙醇：0-3.5％，余量为水；上述的模拟移动床由4～8根色谱柱组成，色谱柱分四个区域，每区由1～2支相同的色谱柱串联；进样液流速Up为15-20ml/min；洗脱液流速UE为20-35ml/min；萃余液流速UR为15-20ml/min；萃取液流速UX为20-35ml/min；切换时间Ts为0.5～60min；

将萃取液和萃余液分别用薄膜旋转蒸发器浓缩至无醇味，用乙醇洗出后在真空干燥箱烘干至恒重。

进一步地，步骤1)中，按照料液比1：5加入水。