[发明专利]基于light-up银簇探针的荧光生物传感器及其在miR-122检测中的应用在审
| 申请号： | 201910889780.2 | 申请日： | 2019-09-20 |
| 公开（公告）号： | CN110564817A | 公开（公告）日： | 2019-12-13 |
| 发明（设计）人： | 王玉;张雪;刘素;黄加栋;宋晓蕾;李莎莎;王敬锋;王海旺;孙文玉;王业茹 | 申请（专利权）人： | 济南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6825 | 分类号： | C12Q1/6825;C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 37218 济南泉城专利商标事务所 | 代理人： | 李桂存 |
| 地址： | 250022 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 银簇 探针 检测 杂交 生物传感器技术 荧光生物传感器 链置换反应 发夹 定量检测 通路结构 银纳米簇 荧光信号 早期诊断 互补链 无标记 传感器 荧光 碱基 制备 暴露 疾病 | ||
1.基于light-up银簇探针的荧光生物传感器，其特征在于，包括以下原料：IS链、GrHP探针、BS链、银簇、缓冲液、miR-122；
所述的GrHP碱基系列如SEQ No.1所示；
所述的IS碱基系列如SEQ No.2所示；
所述的BS碱基系列如SEQ No.3所示；
所述的AgNC-SP碱基系列如SEQ No.4所示；
所述的miR-122碱基系列如SEQ No.5所示。
2.权利要求1所述的荧光生物传感器的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）银纳米簇的制备；
（2）均相中银纳米簇和三通路结构发生链置换反应。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（1）的过程为：
将15μL，100μM AgNC-SP和4.5μL，2mM硝酸银的混合溶液加入到76μL，20 mM，pH6.5磷酸盐缓冲液中并于4℃反应15 min；之后，将4.5μL 2mM的硼氢化钠加入到体系中，于暗处放置6小时以上，既得银纳米簇。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）的过程为：
将IS链、GrHP探针、BS链及步骤（1）的银纳米簇加入到缓冲液中在37℃下反应半小时使其形成三通路结构，之后将miR-122加入到三通路体系中反应；最后，向反应体系中加入超纯水混合用荧光分光光度计进行检测。
5.根据权利要求2或4所述的制备方法，其特征在于，所述的步骤（2）的过程为：
将IS链、 GrHP探针、BS链及步骤（1）的银纳米簇加入到1×缓冲液中在37℃下反应半小时使其形成三通路结构，之后将miR-122加入到三通路体系中反应30min；最后，向反应体系中加入50μL超纯水混合用荧光分光光度计进行检测；荧光波谱测量条件：激发波长为565nm, 激发和发射的狭缝均为10nm。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的缓冲溶液为：50mM NaCl，10mMTris-醋酸，10mM MgCl2，100μg·mL-1 BSA；25℃，pH7.9。
7.权利要求1所述的荧光生物传感器在miR-122检测中的应用。
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