[发明专利]一种5-溴-4-氯-1-乙酰基-3-吲哚酚合成方法

说明书

本发明公布了一种5‑溴‑4‑氯‑1‑乙酰基‑3‑吲哚酚合成工艺方法。本发明采用非常易得的3‑氯‑2‑甲基苯胺作为起始原料，经过乙酸酐形成乙酰化、溴素加成、双氧水氧化、酸性条件下水解、氯乙酸亲核反应、乙酸酐环化、亚硫酸钠选择性水解等七步得到5‑溴‑4‑氯‑1‑乙酰基‑3‑吲哚酚。再利用5‑溴‑4‑氯‑1‑乙酰基‑3‑吲哚酚作为产色原的吲哚酚与酶底物间接缩合得到吲哚显色底物。该方法以工艺简单实用，该方法的各个反应条件非常温和，各种原料容易得到，工艺安全环保，易于工业化。

背景技术

吲哚酚在空气中易于自聚成二聚体形成靛蓝，该聚体不溶于水、热稳定性高并形成稳定的显色性。其在各种酶的检测中有着广泛的应用，特别是作为产色原的吲哚酚或基取代物与酶底物间缩合而成。合成了该5-溴-4-氯-1-乙酰基-3-吲哚酚后，再与酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物，被对应的微生物酶水解产物相应的显色物质，不需要借助紫外线照射观察、大多在固体培养基中无扩散现象。

Holt等人（Proc.R.Soc.B,1958,148.481-494）公开了以邻氨基苯甲酸、卤代苯胺作为起始物，经过一系列合成出一系列不同取代的1-乙酰基-3-吲哚乙酯的合成方法，但是该方法有很多步骤中使用了危险或者不易控制的条件，并且得到的这个产品不易合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

Rodriguez-Dominguez等人曾公开了1-乙酰基-5-溴-6-氯-3-溴吲哚乙酯酯的另一种合成方法，以2，4-二氯苯甲酸起始原料，先在液溴/单质硫/加热条件下发生溴代反应，得到的5-溴-2，4-二氯苯甲酸利用铜粉为催化剂与甘氨酸发生缩合反应，并将得到的中间体在乙酸酐与无水乙酸钠加热回流条件下发生环化反应得到1-乙酰基-5-溴-6-氯-3-溴吲哚乙酯；但过程复杂并且总收率不高；并且得到的这个产品不宜合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

Gandy等人报告了1-乙酰基-5-溴-6-氯-3-溴吲哚乙酯的新合成方法。该方法以4-氯-2-氟苯甲醛为起始物，依次经过与盐酸羟胺的亲核加成后脱水反应，与氨基乙酸乙酯盐酸盐的缩合反应，与溴化铵、双氧水的芳环溴代反应，水解和最后环化反应，得到1-乙酰基-5-溴-6-氯-3-溴吲哚乙酯；得到的这个产品不宜合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

中国专利CN103145605A一种1-乙酰基-卤代吲哚基-3-乙酸酯的合成方法，采用邻氨基苯甲酸及其氯代物作起始原料，再利用N-溴代丁二酰亚胺以及催化剂反应得到1-乙酰基-卤代吲哚基-3-乙酸酯。得到的这个产品不宜合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

中国专利CN106986809A《一种5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯的合成方法》是将4-氯-2-氨基苯甲酸与N-溴代丁二酰亚胺经过溴代反就得到5-溴-4-氯-2-氨基苯甲酸，再经过环化脱羧反应得到5-溴-6-氯-3-溴吲哚乙酯再进行酯交换反应，得到5-溴-6-氯-3-吲哚辛酯，有相类似的步骤，但不能得到这种关键中间体。得到的产品不宜合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

Oganic Lettersr的工艺路线是用4-溴-3-氯-2-甲基苯胺作为起始原料，经过酰胺化、高锰酸钾氧化、三光气、氢化钠、四三苯基磷钯催化等许多步骤得到-溴-4-氯-3-吲哚基-α-D-N-乙酰基神经氨酸钠盐。

中国授权专利《一种制备用于靛蓝合成的3-羟基吲哚衍生物的方法》（申请号：CN01104336.9）将乙醛酸酯或乙醛酸半缩缩与胺反应，制备N-取代甘氨酸酯或N-取代甘氨酸，并氢化生成相应的中间体并在碱金属或碱土金属的熔融条件进行环化反应。该方法使用了贵金属如铂、钯等作为催化剂，在20-80巴的加压条件下与氢气发生加氢反应，总收率很低，而且反应过程复杂，使用了危险或者不易控制的条件，并且得到的这个产品不宜合成酶底物的衍生物如糖、氨基酸、肽、酯、核苷酸的卤代物形成对应的化合物。

发明内容