[发明专利]一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌粉制备方法

说明书

本发明公开了一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌粉制备方法，属于马克斯克鲁维酵母菌制品生产技术领域。所述马克思克鲁维酵母Kluyveromyces.Marxianus，保藏号为CGMCC NO.14274，菌株编号为SXJ2，保藏日期为2017年6月26日。该马克思克鲁维酵母菌冻干菌粉的制备主要包括以下步骤：a)菌种活化与增殖培养；b)收集菌体；c)预冻及真空冷冻干燥。本发明中以每100mL菌悬液添加10.5g～11.5g蔗糖、4.5g～5.5g甘露醇、15.0g～16.0g麦芽糊精、7.5g～8.5g脱脂乳粉为冻干保护剂。本发明的马克斯克鲁维酵母菌冻干菌粉是在含糖蜜、麸皮等物质的增殖培养基中进行增殖的，增殖的菌液经离心处理，加入蔗糖、甘露醇、麦芽糊精、脱脂乳粉等物质作为冻干保护剂，干燥后得到更高存活率的冻干菌粉。

技术领域

本发明属于马克斯克鲁维酵母菌制品生产技术领域，涉及一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌粉制备方法。

背景技术

马克斯克鲁维酵母菌(Kluyveromyces marxianus)是发酵生产乳制品的优质菌种，可以产生多种芳香物质，赋予乳制品独特的风味特点；产生有益于人体健康的各种酶类、维生素及其它活性成分，丰富乳制品的营养及益生功能特性。Kluyveromycesmarxianus同时还具有代谢乳糖功能，有效地将乳糖分解成半乳糖，缓解消费者乳糖不耐症。特别是部分马克斯克鲁维酵母菌菌株酒精产量低，可利用低成本的发酵底物来进行菌种生产和菌剂的制备，因此，被认为是替代酿酒酵母进行工业发酵生产含醇乳饮品的优良候选菌种，成为了越来越多研究学者眼中的新宠儿。

菌种在真空冷冻干燥时，酶的活性丧失少，并能保持菌种形态、色泽，冷冻干燥菌粉复水性好，脱水彻底，保存期长，储存运输和使用都很方便。但是，在实际的使用时，冷冻干燥过程中水的结晶、细胞的失水等情况使得菌体出现死亡或损伤，对于菌种的保存、生产使用非常不利。有报道称，菌体在无任何保护措施下冻干时会使其存活率很低，甚至低至0.1％。

在欧洲，食品安全局已将马克斯克鲁维酵母列入食品和饲料添加的安全生物制剂范围，表明了马克斯克鲁维酵母的安全性和重要价值。在国内，研究者已经认识到马克斯克鲁维酵母的商业化价值，但严重缺乏相关马克斯克鲁维酵母冻干菌粉的研究，极度不利于马克斯克鲁维酵母高活性菌剂的工业化应用。

有报道称，冻干保护剂的使用可以极大地提高菌体在真空冷冻干燥下的存活率和冻干菌粉的稳定性。不同微生物其菌种细胞适用的保护剂类型不甚相同，所以针对特定菌种及菌株优化保护剂配方，可以有效的获得高细胞活性的冻干菌剂。

目前，利用乳酸菌制作冻干菌粉的方法比较常见，而用马克思克鲁维酵母制作冻干菌粉的方法较为少见。陕西科技大学陈合等人申请的“一种嗜热链球菌冻干菌粉的制备方法”(CN 103937725 A)是利用嗜热链球菌制备冻干菌粉。汉臣氏(沈阳)儿童制品有限公司闵祥博等人申请的“一种乳双歧杆菌冻干菌粉的制备方法”(CN 109022322 A)是利用乳双歧杆菌制备冻干菌粉。上海谱莱生物技术有限公司方曙光申请的“一种嗜酸乳杆菌冻干菌粉的制备方法”(CN101486986B)是利用嗜酸乳杆菌制备冻干菌粉。北京农学院刘慧等人申请的“一种降血清胆固醇马克斯克鲁维酵母冻干菌粉的制备方法”(CN 102524794 A)是利用马克思克鲁维酵母制备冻干菌粉，但是其冻干存活率只有65％-70％。

发明内容

本发明的目的是提供一株优质的马克斯克鲁维酵母，本发明是通过筛选、优化冻干保护剂配方以提高所述菌株冻干存活率的冻干菌粉制备方法。

本发明所述的一种马克斯克鲁维酵母菌，已于2017年6月26日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏号：CGMCC NO.14274，菌株编号：SXJ2，建议的分类命名为：马克斯克鲁维酵母菌Kluyveromycesmarxianus。

本发明的一种马克斯克鲁维酵母菌冻干菌粉制备方法，按照下述步骤进行：