[发明专利]一种基于外周血的胃癌生物标志物及其检测方法和应用

说明书

本发明公开了一种基于外周血的胃癌生物标志物及其检测方法和应用。本发明同时公开了通过检测外周血RNA m⁶A水平来诊断胃癌的试剂或试剂盒。本发明提供的特异的外周血RNA m⁶A通过单独或联合相关mRNA或联合血清肿瘤标志物检测组合作为诊断胃癌的中间结果，有助于医师结合临床症状、病史或其他检查信息进行胃癌的诊断。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及一种基于外周血的胃癌生物标志物及其检测方法和应用。

背景技术

胃癌作为起源于胃黏膜上皮的恶性肿瘤，是消化系统最常见的恶性肿瘤之一。2018年全球胃癌新发病例预计超过100万例，死亡病例约78.3万例，分别位于恶性肿瘤发病率第5位、病死率第3位。70％以上的胃癌新发病例来自发展中国家，近半数的病例来自东亚。因此，胃癌的早期诊断显得尤为重要。目前，胃镜活检、血清肿瘤相关标志物的检测是主要的诊断工具。但胃镜活检创伤性大，而临床常用的血清肿瘤相关标志物如癌胚抗原(CEA)和糖类抗原199(CA199)、糖类抗原224(CA224)、糖类抗原724(CA724)存在灵敏度低、特异性差等缺点，不适合于大规模的筛查工作。故我们急需找到一种检查便利、灵敏度高、特异性好的检查手段。

表观遗传学(epigenetics)是一门新兴学科，其定义为非DNA序列变化所致的可遗传的基因表达变化，主要研究内容包括DNA甲基化、组蛋白翻译后修饰、染色质重塑以及microRNA、siRNA、RNA甲基化等调控方式。其中，RNA甲基化是近几年发展起来的一个新的研究方向，是表观遗传学领域的前沿热点。在真核生物中，m⁶A(N⁶-methyladenosine)指的是RNA腺嘌呤(A)上的N6位发生的可逆性甲基化修饰。作为mRNA上丰度最高(超过80％)的化学修饰，平均每一条mRNA含有3～5个m⁶A修饰位点，存在于保守序列RRACH(R＝G,A；H＝A,C orU)中。m⁶A甲基化是一个动态可逆的过程，这一过程受甲基化酶和去甲基化酶所调控，METTL3、METTL14、WTAP是甲基化酶复合体的核心组分，FTO和ALKBH5则是重要的去甲基化酶。这种RNA层面的甲基化修饰方式在维持细胞功能、胚胎发育、干细胞自我更新和分化、热休克或DNA损伤应答及肿瘤发生等病理生理过程中起着非常重要的调控作用，该机制的异化可导致基因表达的异常及其下游信号通路的失调，从而引发基因调控紊乱相关的各种疾病的发生。

发明内容

发明目的：本发明目的在于提供了一种基于外周血的胃癌生物标志物及其检测方法和应用。

技术方案：本发明第一方面提供了一种胃癌生物标志物，所述胃癌生物标志物为外周血中的RNAm⁶A、ALKBH5、FTO、血清CEA及血清CA199中的一种或多种。

优选地，所述胃癌生物标志物为外周血RNAm⁶A；优选地，所述胃癌生物标志物为外周血RNAm⁶A、ALKBH5以及FTO的标志物组合，或者为外周血RNAm⁶A、血清CEA及血清CA199的标志物组合。

所述ALKBH5及FTO为ALKBH5及FTO在外周血中的表达水平，具体为ALKBH5和FTO的mRNA的表达水平。

所述血清CEA及血清CA199为血清中CEA的水平及血清中CA199的水平。

本发明第二方面提供了胃癌生物标志物用于制备早期诊断胃癌试剂或试剂盒的用途或在制备诊断胃癌试剂或试剂盒的用途，所述胃癌生物标志物为外周血中的RNA m⁶A、ALKBH5、FTO、血清CEA及血清CA199中的一种或多种。