[发明专利]一种用于鉴别不同茭白类型的分子标记、引物对、试剂盒及方法有效
| 申请号： | 201910610125.9 | 申请日： | 2019-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN110331223B | 公开（公告）日： | 2021-06-01 |
| 发明（设计）人： | 张敬泽;郭赛赛;郭得平 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人： | 沈金龙 |
| 地址： | 310013 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 鉴别 不同 茭白 类型 分子 标记 引物 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.引物对在鉴别幼苗为灰茭或正常茭白中的应用，所述引物对包括上游引物和下游引物，序列为：
上游引物Pra1-F：5’-CCACGGCGAATAAGGCTC-3’；
下游引物Pra1-R：5’-GCAAGGTTCAAAGCCCAG-3’。
2.一种鉴别不同茭白类型的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)提取待检测茭白样品的DNA；
(2)以步骤(1)提取的DNA作为模板，利用引物对进行PCR扩增，
所述引物对包括上游引物和下游引物，序列为：
上游引物Pra1-F：5’-CCACGGCGAATAAGGCTC-3’；
下游引物Pra1-R：5’-GCAAGGTTCAAAGCCCAG-3’；
(3)电泳检测PCR扩增产物，如电泳检测结果出现475bp的DNA条带，则待检测茭白样品为灰茭；如果没有条带，则为正常茭白。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，待鉴别的茭白处于幼苗期。
4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，待检测茭白样品为茭白幼苗的节间菌丝。
5.如权利要求2所述的方法，其特征在于，PCR扩增反应体系为：
6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，PCR扩增条件为：
94℃预变性4min；94℃变性30s，63℃退火30s，72℃延伸20s，共30个循环；72℃延伸10min，4℃保温。
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