[发明专利]筛选药对活性成分及其配比优化的方法有效
| 申请号: | 201910583708.7 | 申请日: | 2019-07-01 |
| 公开(公告)号: | CN110297046B | 公开(公告)日: | 2022-01-11 |
| 发明(设计)人: | 李飞;徐茜茜;李萍 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/88;G01N33/15 |
| 代理公司: | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人: | 黄欣 |
| 地址: | 210009 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 筛选 活性 成分 及其 配比 优化 方法 | ||
1.一种基线等比法联合数学模型筛选药对活性成分及其配比优化的方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1,基于基线等比法配伍羌活-独活药对,将独活、羌活药材粉末配比,具体比例为:40g:0g、36g:4g、32g:8g、28g:12g、24g:16g、20g:20g、16g:24g、12g:28g、8g:32g、4g:36g、0g:40g,分别加入400mL 50%乙醇,提取3次,每次1h,滤过,合并3次提取液,冷冻干燥得独羌药对提取物冻干粉,备用;
步骤2,利用UPLC-QTOF/MS及UPLC-QQQ/MS对步骤1药对的主要活性成分进行定性定量鉴定,主要活性成分为紫花前胡苷、佛手酚、补骨脂素、花椒毒素、佛手柑内酯、羌活醇、蛇床子素、异欧前胡素和二氢欧山芹醇当归酸酯;
步骤3,利用脂多糖LPS诱导RAW264.7小鼠巨噬细胞建立炎症细胞模型,利用VEGF刺激HUVECs内皮细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成,研究步骤1中不同比例独羌药对对VEGF诱导HUVECs内皮细胞血管生成的抑制作用及其对LPS诱导EAW264.7巨噬细胞NO生成的抑制作用;
步骤4,以不同比例独羌药对中9个主要成分的峰面积作为谱效关系中的“谱”,以不同比例独羌药对对VEGF诱导HUVECs内皮细胞血管生成的抑制作用的药效学数据以及不同比例独羌药对对LPS诱导EAW264.7巨噬细胞NO生成的抑制作用的药效学数据作为谱效关系中的“效”,建立谱效关系;
步骤5,对羌活-独活药对样品对RAW264.7巨噬细胞抗炎抑制和HUVECs内皮细胞血管生成4个药效指标数据经功效系数法评分,消除量纲差异后再进行聚类分析和主成分分析,筛选得到治疗类风湿关节炎的独羌药对最优配比组方为独活28g、羌活12g。
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