[发明专利]一种棉花育性恢复相关的分子标记及其应用

权利要求书

1.鉴定或辅助鉴定待测棉花恢复基因的引物对，其由引物1和引物2组成；所述引物1为序列表中序列2所示的单链DNA分子；所述引物2为序列表中序列3所示的单链DNA分子；所述棉花恢复基因的InDel分子标记为序列表中序列1所示的DNA分子；所述引物对用于检测所述棉花恢复基因的InDel分子标记。

2.根据权利要求1所述的引物对，其特征在于：所述引物1和引物2的摩尔比为1:1。

3.权利要求1或权利要求2所述的引物对在如下(1)-(6)任一中的应用：

(1)鉴定或辅助鉴定棉花材料是否含有恢复基因及位点是否纯合；

(2)制备鉴定或辅助鉴定棉花材料是否含有恢复基因及位点是否纯合的产品；

(3)鉴定或辅助鉴定棉花恢复系；

(4)制备鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的产品；

(5)鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的种子纯度；

(6)制备鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的种子纯度的产品。

4.一种鉴定或辅助鉴定棉花恢复基因的方法，包括如下步骤：

采用权利要求1或2所述的引物对对待测棉花样品的基因组DNA进行PCR扩增；对PCR扩增产物进行电泳分析；根据扩增结果进行判断，标准如下：

如果只扩增出113bp的单一条带，则待测棉花材料不含恢复基因位点；

如果只扩增出182bp的单一条带，则待测棉花材料的恢复基因位点纯合；

如果同时扩增出113bp和182bp这两个条带，则待测棉花材料的恢复基因位点杂合；

所述恢复基因的InDel分子标记为序列表中序列1所示的DNA分子。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述电泳分析为琼脂糖凝胶电泳分析。

6.权利要求4所述的方法在如下(1)-(6)任一中的应用：

(1)鉴定或辅助鉴定棉花材料是否含有恢复基因及位点是否纯合；

(2)制备鉴定或辅助鉴定棉花材料是否含有恢复基因及位点是否纯合的产品；

(3)鉴定或辅助鉴定棉花恢复系；

(4)制备鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的产品；

(5)鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的种子纯度；

(6)制备鉴定或辅助鉴定棉花恢复系的种子纯度的产品。

7.棉花恢复系回交改良的方法，包括如下步骤：

采用权利要求1或2所述的引物对，对用于恢复系回交改良的转育群体从回交一代开始进行分子标记跟踪，每一代从回交群体中选择综合农艺性状优良且恢复基因位点杂合的单株，继续与轮回亲本材料进行回交；这样回交4-6代后，再选择目标优良单株自交，自交后代继续采用权利要求1或2所述的引物对进行分子检测，筛选出综合农艺性状优良且恢复基因位点纯合的新恢复系材料。

8.根据权利要求7所述的棉花恢复系回交改良的方法，其特征在于：所述恢复基因位点杂合的单株为含有182bp和113bp两个目标条带的单株；所述恢复基因位点纯合的新恢复系材料为只扩增出182bp的单一条带的新恢复系材料。