[发明专利]神经退行性疾病动物模型及其建立与应用

说明书

本发明涉及神经退行性疾病动物模型及其建立与应用。具体地，本发明提供了一种非人哺乳动物的神经退行性疾病动物模型的制备方法，包括步骤：(a)提供非人哺乳动物的细胞，对所述细胞中的Uchl1基因进行点突变，从而得到Uchl1基因点突变的细胞；(b)利用步骤(a)中得到的Uchl1基因点突变的细胞，制备具有Uchl1基因点突变的动物模型；其中，在所述的动物模型中，Uchl1基因点突变是纯合型。本发明的小鼠模型与人类的帕金森病高度相似。基于该模型动物的帕金森病药物筛选平台，可用于筛选新药以及开发其他治疗方法。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地，本发明涉及神经退行性疾病动物模型及其建立与应用。

背景技术

神经退行性疾病主要包括帕金森(Parkinson's,PD)、阿尔茨海默病(Alzheimer's,AD)和亨廷顿氏舞蹈症(Huntington's,HD)等，主要由于神经元代谢异常或者营养障碍逐渐导致神经元功能异常甚至丧失。其共同特征包括①蛋白不溶性增加，异常蛋白沉积；②微管动力学异常进而导致聚集化障碍；③大脑和脊髓神经元细胞丧失。

帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一种严重危害中老年人健康的神经退行性疾病，具有多种临床表现，包括静止性震颤、运动迟缓、肌张力增高和姿势平衡障碍等^[1]，另外通常伴随非运动症状包括认知功能障碍和痴呆。帕金森病是第二大神经变性疾病，在50岁以上的人群患病率为1-2％，随着社会老龄化的进展，患病率有增高趋势。然而，由于PD的病因不明，临床上仅仅是对症治疗，不能阻止疾病进展，故而帕金森病成为老年人致残的主要因素之一。

目前较为公认的建立PD模型的方法主要有两种:一种是应用6-羟基多巴胺(6-0HDA)注入黑质纹状体系统来损毁大鼠黑质-纹状体系统多巴胺(DA)能神经元所制成的模型，该建模需要三维立体定向注射，技术操作要求较高，存在较高失败率；另一种是运用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)制备猴等灵长类动物模型和小鼠模型，但是MPTP对人类同样具有不可修复的神经毒性，操作需要严格的安全控制。且两种方法都不能准确模拟帕金森病的病理过程，比如MPTP模型中路易小体(Lewy body)并不出现，因此目前使用的帕金森病模型存在的不足之处极大地限制了这些模型的应用。

因此，本领域迫切需要开发一种新的有效模拟神经退变性病变的非人哺乳动物。

发明内容

本发明的目的是提供一种新的有效模拟神经退变性病变的非人哺乳动物模型。所述动物模型可模拟临床的非人哺乳动物神经退变模型，有望广泛应用于治疗神经退行性疾病的治疗技术和药物的筛选与评价。

在第一方面，本发明提供了一种非人哺乳动物的神经退行性疾病动物模型的制备方法，该方法包括以下步骤：

(a)提供非人哺乳动物的细胞，对所述细胞中的Uchl1基因进行点突变，从而得到Uchl1基因点突变的细胞；

(b)利用步骤(a)中得到的Uchl1基因点突变的细胞，制备具有Uchl1基因点突变的动物模型；

其中，在所述的动物模型中，Uchl1基因点突变是纯合型。

在另一优选例中，所述的神经退行性疾病选自下组：帕金森病(Parkinson's,PD)、阿尔茨海默病(Alzheimer's,AD)和亨廷顿氏舞蹈症(Huntington's,HD)。

在另一优选例中，所述的神经退行性疾病为帕金森病。

在另一优选例中，所述的Uchl1基因点突变包括：将UCHL1蛋白的第93位的氨基酸I突变为除了I之外的其他19种氨基酸所形成的点突变。