[发明专利]神经退行性疾病动物模型及其建立与应用

权利要求书

1.一种非人哺乳动物的神经退行性疾病动物模型的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(a)提供非人哺乳动物的细胞，对所述细胞中的Uchl1基因进行点突变，从而得到Uchl1基因点突变的细胞；

(b)利用步骤(a)中得到的Uchl1基因点突变的细胞，制备具有Uchl1基因点突变的动物模型；

其中，在所述的动物模型中，Uchl1基因点突变是纯合型。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的Uchl1基因点突变包括：将UCHL1蛋白的第93位的氨基酸I突变为除了I之外的其他19种氨基酸所形成的点突变。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述Uchl1基因点突变是将第93位I突变为M。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述非人哺乳动物为啮齿动物或灵长目动物，较佳地包括小鼠、大鼠、兔、猴。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(b)中，包括步骤：

(b1)制备获得嵌合的Uchl1基因点突变的动物模型，然后通过杂交，获得杂合型Uchl1基因点突变动物模型；和

(b2)通过所述杂合型Uchl1基因点突变动物模型的杂交，获得纯合型Uchl1基因点突变动物模型。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)利用CRISPR-CAS9技术，构建Uchl1基因I93M靶向剪切质粒，并用筛选标记的同源突变DNA序列替换，得到Uchl1-I93M点突变阳性单克隆非人哺乳动物胚胎干细胞；

(2)利用步骤(1)中得到的Uchl1基因点突变的非人哺乳动物胚胎干细胞克隆株，制备得到嵌合非人哺乳动物；

(3)将步骤(2)中得到的嵌合非人哺乳动物和正常野生型非人哺乳动物交配繁育，在后代中筛选获得Uchl1基因点突变的杂合子非人哺乳动物；

(4)通过将步骤(3)中得到的杂合子非人哺乳动物相互交配获得Uchl1-I93M点突变的纯合子非人哺乳动物，从而得到Uchl1-I93M点突变的非人哺乳动物模型。

7.根据权利要求1-6之任一项所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，该模型被用作研究神经退行性疾病的动物模型。

8.根据权利要求1-6之任一项所述方法制备的非人哺乳动物模型的用途，其特征在于，该模型被用于筛选或鉴定可减轻或治疗神经退行性疾病的物质(治疗剂)。

9.一种筛选或鉴定治疗或缓解神经退行性疾病的潜在治疗剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.将候选物质施用于权利要求1所述方法制备的非人哺乳动物模型；和

b.对所述动物模型的行为进行行为学分析，并与对照组进行比较；

其中，与对照相比，如果施用了候选物质的动物模型中表征神经退行性疾病行为得到改善，则表明该候选物质是神经精神疾病的潜在治疗剂。

10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的行为学分析包括：滚轴试验、高架十字迷宫实验、或其组合。