[发明专利]一种利用转铁蛋白受体1评价低剂量伽马射线辐射损伤的方法

说明书

本发明涉及一种利用转铁蛋白受体1评价低剂量伽马射线辐射损伤的方法。利用人体外周血AHH1淋巴细胞中TFRC1对低剂量伽马射线辐射非常敏感的特性，根据人体外周血AHH1淋巴细胞接受的低剂量伽马射线辐射剂量与TFRC1的相对表达量的上调率的剂量‑效应关系，通过检测人体外周血AHH1淋巴细胞中TFRC1的相对表达量的上调率，评估低剂量伽马射线辐射对人体血液的生物损伤。该方法具有操作简便快速、成本低廉、灵敏度高、特异性强、准确性好、环境风险小等多重优点。

技术领域

本发明属于伽马射线辐射损伤评价技术领域，利用分子标记物进行低剂量伽马辐射损伤评价的方法，具体是利用人外周血AHH1淋巴细胞中转铁蛋白受体1（TFRC1）的相对表达量上调率来评价低剂量伽马射线辐射损伤的方法。

背景技术

在大规模核辐射事故医学救援中，对电离辐射暴露人群的接受的受照剂量和生物损伤进行快速有效的估算是救治的关键。随着分子生物学技术的深入发展，基因水平的生物标志物因其快速、简便和灵敏的特点而有可能被用作评价低剂量辐射损伤。

外周血淋巴细胞对于电离辐射非常敏感，由于其可从血液中获得，也易于培养，成为辐射损伤检测的最佳对象。有研究表明外周血淋巴细胞中DDB2、CDKN1A 和XPC 基因在0.2 −2 Gy 的高剂量电离辐射后，辐射剂量与mRNA 的表达量之间具有线性剂量−效应关系。然而对于低剂量辐射条件下，基于分子标记物的辐射损伤评价方法尚未建立。

由于放射性同位素、核能及放射性诊断和治疗的广泛应用，人体的血液在很多情况下都会受到低剂量照射，可引起血液的各种并发症，血液的辐射损伤引起人们的普遍关注，亟需筛选可以评估低剂量辐射损伤的生物分子标记物，对人体血液的低剂量辐射损伤进行评价。

发明内容

针对上述情况，本发明提供一种利用人体外周血AHH1淋巴细胞中转铁蛋白受体1（TFRC1）的相对表达量的上调率来评价低剂量伽马射线辐射损伤的方法。本发明利用人体外周血AHH1淋巴细胞中TFRC1对低剂量伽马射线辐射非常敏感的特性，根据人体外周血AHH1淋巴细胞接受的低剂量伽马射线辐射剂量与TFRC1的相对表达量的上调率的剂量-效应关系，通过检测人体外周血AHH1淋巴细胞中TFRC1的相对表达量的上调率，评估低剂量伽马射线辐射对人体血液的生物损伤。其原理是，TFRC1作为细胞内铁摄取和调节细胞生长相关的Ⅱ型跨膜糖蛋白，由两个单体通过二硫键连接的组成。每个单体结合一个全转铁蛋白分子，产生铁Tf-TfR复合物，其通过胞吞作用进入细胞。转铁蛋白受体转运的三价铁离子通过还原变成二价铁离子，可以与细胞内的过氧化氢发生芬顿反应生成活性氧自由基，即Fe²⁺+ H₂O₂→Fe³⁺+（OH）^-+OH·，产生的活性氧自由基可导致细胞的死亡。该方法具有操作简便快速、成本低廉、灵敏度高、准确性好、环境风险小等多重优点。

具体步骤是：

（1）人体外周血AHH1淋巴细胞的培养；

（2）伽马射线辐射；

（3）TFRC1的相对表达量上调率的检测；

（4）辐射损伤综合评价。

其进一步的措施是：

所述的人体外周血AHH1淋巴细胞的培养具体方法为：

人体外周血淋巴细胞AHH-1（编号ATCC CRL-8146），用含10%血清（Gibco 澳洲胎牛）IMDM培养液中，置于37℃，5% 二氧化碳培养箱，每隔3 天换一次培养液，每隔3-5天进行一次细胞传代，取对数生长期细胞进行实验。

所述的伽马射线辐射具体方法为：