[发明专利]用于检测玉米源成分的LAMP引物组及其用途

说明书

本发明属于生物分子检测技术领域，具体涉及一种用于检测玉米源成分的LAMP引物组及其用途。本发明的用于检测玉米源成分的LAMP引物组包括FIP引物、F3引物、BIP引物、B3引物和LB引物，本发明的LAMP检测体系具有良好的特异性和灵敏度，能快速、方便、高效的检测样品中是否含有玉米成分，可用于红薯粉条品质的快速准确检测，以满足国家对红薯粉条原料真实性检测的迫切需要。

技术领域

本发明属于生物分子检测技术领域，具体涉及一种用于检测玉米源成分的LAMP引物组及其用途。

背景技术

玉米是常用的粮食作物，由于价格低廉，市场上会有在其他产品中掺入玉米以次充好的情况发生。

以粉条为例，粉条是我国人民喜食的传统食品之一，具有食用方便、快捷、营养合理和口味丰富等特点，受广大消费者的喜爱和欢迎，其中红薯粉条始终伴随人们的日常饮食，其营养价值和适宜口感深受喜爱。红薯(又名红苕、甘薯、地瓜、山芋等)是一种古老的薯类作物，种植过程中无农药污染，低化肥使用，是消费者最放心的绿色食品原料。红薯富含蛋白质、淀粉、维生素及多种矿物质，并有防癌、通便、养颜、益寿等功效，被誉为“天然绿色食品”和“长寿食品”，居绿色蔬菜之首。近些年来，红薯越来越多地被认作为保健食品，市场消费需求不断增加，随着人民生活水平的不断提高和饮食休闲文化欣然兴起，红薯已经上升为食品工业的主要优质原料，在国际上都享有盛誉，这也给中国的红薯粉条产业带来了巨大的市场契机。但是现在的粉条市场存在很多问题。由于玉米淀粉、木薯淀粉的价格都比红薯淀粉低很多，所以很多不法商人为获取假货带来的暴利往粉条里添加玉米淀粉、木薯淀粉，用玉米淀粉制作所谓的“纯红薯粉条”，为让色泽形似、口感筋道，甚至添加墨汁和工业用料石蜡等违规添加剂。目前为检测红薯粉条中含有的有害物质以及判断其真假，已经有很多种方法被建立，但尚未建立从基因的角度检测红薯粉条中是否存在红薯特异基因的方法，对于鉴别是否用其他淀粉制假红薯粉条而言，基因检测方法具有时间短，特异性强，灵敏度高等特点，极具研究价值和意义。

《食品中若干植物源成分的PCR检测》(《食品科学》，2006，Vol.27，No.11,陈文炳，邵碧英等，P404-405)，公开了采用PCR方法检测玉米成分的引物；CN 101701256A也公开了玉米的PCR鉴定引物及鉴定方法，该PCR鉴定引物可特异性扩增玉米trnL序列，但其也仅公开了采用玉米植物组织提取得到的DNA为模板进行扩增的实施例；CN 106399540A公开了基于环介导等温扩增消光技术的玉米检测方法，可特异性检测玉米本身的固有的IVR基因，转基因玉米中则不包含该基因；CN 108277294A公开了用于检测玉米DNA的特异性引物和探针，可特异性检测玉米Zein rDNA，Zein是玉米胚乳的主要贮藏蛋白，占胚乳总蛋白质的70％，主要存在于玉米油中。但由于玉米淀粉中所含的DNA相对较少，提取难度大，且粉条等加工食品加工过程中需要对玉米淀粉进行热处理，容易造成DNA的损伤，检测玉米淀粉加工产品中是否含有玉米源成分的难度更大。

《食用淀粉植物源成分鉴别方法-实时荧光PCR法-第七部分玉米淀粉》(中华人民共和国出入境检验检疫行业标准，参见http://www.doc88.com/p-9819120496207.html)公开了可特异性检测玉米的实时荧光扩增PCR引物，特异性好，并以玉米为原料提取DNA进行了绝对灵敏度的测试(反应体系25μL，模板DNA 5μL)，绝对灵敏度可达0.01ng/μL，当从样品中提取得到的玉米DNA为50pg以上时可被检测出来；并将玉米淀粉与木薯淀粉混合，进行了相对灵敏度的测试，相对灵敏度可达0.1wt％(玉米淀粉含量0.1g/100g)。但该标准并未将实施荧光扩增PCR引物应用红薯淀粉加工食品(例如，粉条等)的检测，玉米淀粉在加工过程中常常需要热处理，进而会对淀粉中的DNA造成损伤，检测粉条等加工产品中是否含有玉米源成分的难度更大。

发明内容

本发明的一个目的是提供用于检测玉米源成分的LAMP引物组，以解决现有技术中的基因检测方法不能用于检测玉米淀粉加工食品的问题，具体的技术方案如下：

所述引物组的序列为：