[发明专利]一种用于生产甘精胰岛素的培养基及发酵方法有效
| 申请号： | 201910478456.1 | 申请日： | 2019-06-03 |
| 公开（公告）号： | CN112029810B | 公开（公告）日： | 2023-08-22 |
| 发明（设计）人： | 张贵民;冀成法;王霞 | 申请（专利权）人： | 鲁南制药集团股份有限公司 |
| 主分类号： | C12P21/02 | 分类号： | C12P21/02;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 276005 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 生产 胰岛素 培养基 发酵 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种用于生产甘精胰岛素的基础培养基，其特征在于，所述基础培养基组成为：
表1
所述微量元素组成为：
表2
。
2.一种利用权利要求1所述基础培养基生产甘精胰岛素的发酵方法，其特征在于，步骤如下：
a、将重组大肠杆菌菌种在种子培养基中逐级放大培养，获得种子液；
b、种子液接种至发酵罐基础培养基中进行高密度培养，控制发酵液溶氧量不低于30%，温度为36.0~38.0℃，pH值为7.0~7.2，控制pH的物质为氨水，分批次流加补料培养基，溶氧达到90%以上和pH上升时，进行第一次流加补料培养基，控制流速每5~8h流加总补料量的30~35%；加入诱导剂诱导后进行第二次流加补料培养基，控制流速每15~18h流加总补料量的65~70%，至培养结束。
3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述补料培养基组成为：Tryptone 80~120g/L, Yeast extract 40~80g/L, Glycerol 400~600g/L， MgSO4·7H2O 1~3g/L。
4.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述种子液接种至发酵罐基础培养基中的接种量为：种子液的体积为基础培养基体积的5~10%。
5.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，补料培养基用量为基础培养基体积的23~27%。
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