[发明专利]一种西瓜籽蛋白制备抗氧化、降糖、抑菌多活性肽的方法

说明书

本发明公开了一种西瓜籽蛋白制备抗氧化、降糖、抑菌多活性肽的方法，属于食品/农产品及其副产物的精深加工及功能食品制备技术领域。本发明先采用超声预处理西瓜籽蛋白，然后利用碱性蛋白酶进行酶解制备西瓜籽蛋白酶解液，将酶解液通过超滤分离获得一定分子量的超滤液，然后通过收集干燥，得到具有抗氧化、降糖、抑菌活性的西瓜籽多肽。本发明为具有抗氧化、降糖、抑菌多功能活性肽增加了新来源，实现了副产物的充分利用，具有产品活性高、制备过程简单、易于工业化生产、环保等优点。

技术领域

本发明属于食品/农产品及其副产物的精深加工及功能食品制备技术领域，涉及一种西瓜籽蛋白制备抗氧化、降糖、抑菌多活性肽及其方法，可作为功能性成分应用于食品、药品和化妆品等行业中。

背景技术

生物活性肽(例如，抗氧化肽，抗菌肽，降血糖肽，抗高血压肽等)已经引起了国内外广泛的关注，由于它可以通过调节生物体的多种途径来改善机体的生理功能。西瓜籽是西瓜加工后的副产物，含有丰富的蛋白质(30.63-43.60％)和高比例的优质氨基酸(精氨酸，谷氨酸，天冬氨酸和亮氨酸)，是生物活性肽的优质来源。目前，我国仅有小部分西瓜籽用于休闲食品和提取西瓜籽油，而大部分的西瓜籽则被废弃，造成了严重的资源浪费和环境污染。所以对西瓜籽蛋白进行酶解和精细加工是发展食品产业和蛋白质产业的需求。此外，以食源性功能食品作为人工合成多肽药物的替代品成为了研究热点，具有广阔前景。

目前，酶解法被普遍用于多肽的制备，而酶解法存在时间长、蛋白转化率低、耗能等缺点。因此，寻求一种新型、绿色的技术来改善酶解法的不足显得尤为重要。超声是一种理想的、非常有前景的非热物理技术，它能够提高蛋白与酶的接触频率、改变蛋白的结构和功能，从而暴露出更多的活性位点，可以显著改善酶解效率。

本发明采用超声前处理西瓜籽蛋白，通过碱性蛋白酶对其酶解，将其中所隐藏的抗氧化、降糖、抑菌活性肽片段释放出来，得到的酶解液经超滤分离，从而制备出具有抗氧化、降糖和抑菌多活性的肽。我国西瓜产量巨大，约占世界年产量的2/3，西瓜籽作为它的副产物，来源广泛，如能提取活性较高的抗氧化、降糖和抑菌活性的多肽，对西瓜籽的再利用以及丰富多功能肽资源、防止慢性疾病及并发症具有广阔的市场经济效应。

发明内容

本发明首先采用超声预处理西瓜籽蛋白，其次利用碱性蛋白酶进行酶解制备西瓜籽蛋白水解物，再通过超滤分离获得一定分子量的超滤液，超滤液经过脱盐、浓缩、冷冻干燥，得到具有抗氧化、降糖、抑菌多活性的西瓜籽多肽。本发明的目的在于提供一种具有抗氧化、降糖、抑菌活性的西瓜籽多活性肽的制备方法。本发明方法能够实现西瓜籽废弃物原料的高效利用生产多活性肽，具有高效、绿色、操作简便、易于工业化生产等特点。

本发明的技术方案为：

一种西瓜籽蛋白制备抗氧化、降糖、抑菌多活性肽的方法，按照以下步骤进行：

(1)称取一定量西瓜籽蛋白，加入蒸馏水配置成0.5-2.5％(m/v)悬浊液，进行超声预处理，超声功率密度10-30W/L，处理时间20-40min，温度25-45℃，得到西瓜籽蛋白超声处理液；

(2)将步骤(1)得到西瓜籽蛋白超声处理液的pH值调节为7.5-9.5，加入碱性蛋白酶，蛋白酶与底物的比例为1:50-1:150(w/w)，均匀混合，酶解温度30-55℃，酶解时间20-40min；沸水浴10min灭酶，终止酶解反应，在4500r/min转速下离心10min，获得上清液，再经过脱盐、浓缩、冷冻干燥，得到西瓜籽蛋白水解物；

(3)将步骤(2)得到的西瓜籽蛋白水解物置于烧杯中，按照料液比为1:250-1:1000(g/mL)加入蒸馏水，混合均匀并置于超滤装置中，进口压力0.1-0.5MPa，水浴温度10-50℃，超滤膜的截留分子量为1000Da，获得的超滤液经过脱盐、浓缩、冷冻干燥，得到具有抗氧化、降糖、抑菌活性的多肽粉末。