[发明专利]简单节杆菌与基因工程酵母菌株顺序转化制备宝丹酮有效
| 申请号： | 201910264964.X | 申请日： | 2019-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN109971817B | 公开（公告）日： | 2023-06-16 |
| 发明（设计）人： | 王敏;申雁冰;汤睿;夏梦雷;骆健美;屠琳娜;耿宇菡 | 申请（专利权）人： | 天津科技大学 |
| 主分类号： | C12P33/00 | 分类号： | C12P33/00;C12N15/53;C12R1/84;C12R1/06 |
| 代理公司： | 北京瑞盛铭杰知识产权代理事务所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 栗华楠 |
| 地址： | 300457 天津市滨*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 简单 杆菌 基因工程 酵母 菌株 顺序 转化 制备 宝丹酮 | ||
【权利要求书】：
1.一种微生物顺序转化发酵化合物雄甾-4-烯-3,17-二酮（AD）制备化合物宝丹酮（BD）的方法，其特征在于，该方法是将AD先经简单节杆菌发酵后，将反应体系灭活，再经毕赤酵母基因工程菌株顺序发酵制备化合物宝丹酮；
所述毕赤酵母基因工程菌株是在毕赤酵母宿主细胞中过表达17β羰基还原酶编码基因所得；
方法具体如下：在含有底物AD浓度为3g/L-10g/L的生物转化体系中，投加生物量为5g/L的具有C1,2脱氢能力的简单节杆菌，待中间产物雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮（ADD）的量达到最高后，将反应体系灭活，再加入175-200 g/L的毕赤酵母基因工程菌株（
所述17β羰基还原酶 GenBank编号为：KZV10489.1；所述宿主细胞为毕赤酵母GS115，所述毕赤酵母基因工程菌株（
所述简单节杆菌为简单节杆菌（
转化体系中添加毕赤酵母的同时还添加葡萄糖75 g/L；
生物转化体系中采用羟丙基-β-环糊精作为底物助溶剂，其与底物AD的摩尔比为1:1-2:1。
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