[发明专利]一种抗前列腺癌侵袭转移的组合物

说明书

本发明公开一种抗前列腺癌侵袭转移的组合物及其在制备治疗前列腺癌转移药物方面的应用；具体包括协同应用雷公藤内酯和ST6Gal I小干扰RNA(ST6Gal I‑shRNA)的药物组合方案，解决了临床单独应用雷公藤内酯存在毒性大以及单独应用ST6Gal I小干扰RNA(shST6Gal I)可能存在干扰不彻底或影响相似基因功能的问题。在明显增加抗肿瘤转移效果的同时，降低了雷公藤内酯的毒性及对其他相似组织、基因功能的影响，将有助于该药物后期研发，为抑制前列腺癌转移提供新的治疗思路。

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及通过基因干扰技术抑制ST6Gal I基因表达并联合中药雷公藤内酯制备的抗前列腺癌侵袭转移的组合物，及该组合物在制备治疗具有阻断前列腺癌转移药物方面的应用。

背景技术

前列腺癌是男性生殖系统常见恶性肿瘤之一，临床确诊时大多已有转移。目前针对转移性前列腺癌的主要治疗方法为雄激素剥夺疗法，虽然经雄激素剥夺治疗后部分患者病情可有好转,但1年后多数前列腺癌会逐渐失去对雄激素剥夺治疗的敏感性，而继续转移扩散造成病人极大痛苦和最终死亡。因此，目前尚缺少有效的应对前列腺癌转移的治疗手段。

雷公藤内酯，又称雷公藤甲素，是从中药雷公藤中提取的活性成分，具有显著的抗炎、免疫调节等活性，并可延长器官移植患者的生存时间。近年来雷公藤内酯抗肿瘤作用倍受关注，其可抑制多种肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭，如卵巢癌、肾透明细胞癌、口腔癌及白血病。雷公藤内酯亦可促进前列腺癌细胞的凋亡，本课题组研究发现其对前列腺癌细胞的迁移、侵袭亦有明显的抑制作用，但临床应用雷公藤内酯亦再存在不可忽视的剂量相关的肝肾、生殖毒性，因此如何降低其使用剂量又能达到抗肿瘤效果成为其临床应用的一大难题。

唾液酰基转移酶ST6GalⅠ是催化合成唾液酸α2-6连接N-聚糖的关键酶，其所催化形成的α2-6唾液酸化是细胞表面受体重要的糖基化修饰之一。ST6GalⅠ可通过对肿瘤细胞膜表面受体(如整合素)的唾液酸化，影响该受体与细胞外基质成分(如胶原蛋白)的黏附，诱导细胞释放蛋白酶降解基底膜和基质，促使肿瘤细胞发生血道或淋巴道转移。本课题组研究发现 ST6GalⅠ在前列腺癌中高表达，通过小干扰RNA(shRNA)抑制其表达可明显抑制体外前列腺癌细胞发生迁移和侵袭(Wei A,Fan B,Zhao Y,et al.ST6Gal-I overexpressionfacilitates prostate cancer progression via the PI3K/Akt/GSK-3β/β-cateninsignaling pathway.Oncotarget.2016)。但单独小剂量应用小干扰RNA(shRNA)存在干扰不完全、不彻底的问题，大剂量应用有可能抑制与特异性靶基因有一定序列相似性的基因的表达。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明发现协同应用小干扰RNA(shRNA)和雷公藤内酯，在明显增加抗肿瘤转移效果的同时，大幅降低了雷公藤内酯的毒性及对其他相似组织、基因功能的影响，将为抑制前列腺癌转移提供新的治疗思路。本发明设计了如下技术方案：

本发明提供一种抗前列腺癌侵袭转移的组合物，该组合物由内含唾液酰基转移酶小干扰 RNA序列的重组质粒与雷公藤内酯组成。

对于上文所述的技术方案而言，具体的所述重组质粒终浓度为3.0～5.0μg/mL，雷公藤内酯浓度为20～30nM。优选的浓度为重组质粒终浓度为4.0μg/mL，雷公藤内酯浓度为25nM。

对于上文所述的技术方案而言，具体的所述重组质粒中ST6Gal I小干扰RNA的序列为：

正义链SEQ ID No.1:

5’-CACCCTGGGATGCTTGGTATCATTTCAAGAGAATAATCCGGATTCTGGTACTTTTT TG-3’；

反义链SEQ ID No.2: