[发明专利]一种检测海洋食品中铅污染的方法有效
| 申请号: | 201910252197.0 | 申请日: | 2019-03-29 |
| 公开(公告)号: | CN109880882B | 公开(公告)日: | 2022-03-25 |
| 发明(设计)人: | 王家磊;刘志敏;毕迎斌 | 申请(专利权)人: | 山东时进检测服务有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/34 | 分类号: | C12Q1/34;C12N9/80;G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司: | 济南千慧专利事务所(普通合伙企业) 37232 | 代理人: | 吴绍群 |
| 地址: | 264300 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 海洋 食品 污染 方法 | ||
1.一种检测海洋食品中铅污染的方法,其特征在于,所述方法包括利用海洋食品处理SEQ ID No.3所示脲酶并检测所述脲酶活性的步骤。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)提供待测海洋食品;
(2)提供SEQ ID No.3所示脲酶;
(3)利用待测海洋食品处理步骤(2)所述脲酶,得到处理组脲酶;并以不经处理的空白脲酶作为对照组脲酶;
(4)检测处理组和对照组脲酶活性;如果处理组脲酶低于对照组脲酶的活性,则提示待测海洋食品有被铅污染的风险。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述方法具体包括如下步骤:S1、将待测海洋食品进行预处理,使所述海洋食品中的重金属以离子状态存在,获得待测样品液;
S2、使用所述待测样品液处理SEQ ID No.3所示脲酶,检测所述脲酶活性与对照组相比的被抑制程度;
S3、将步骤S2检测的所述脲酶活性的被抑制程度作为一个具体值代入标准曲线方程中,经过计算获得所述海洋食品中的铅浓度;
所述标准曲线方程为铅浓度与SEQ ID No.3所示脲酶活性的被抑制程度所拟合的方程,所述方程的相关系数大于或等于0.9;
优选的,所述标准曲线方程为I=0.105C2+0.328C+1.44,其中,I为脲酶抑制率,单位为%,C为铅浓度,单位为μg/L。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于:步骤S1包括如下步骤:
S11、将所述海洋食品制成匀浆,加入硝酸,获得第一处理液,所述硝酸的加入量为每克所述匀浆加2—3mL;
S12、将所述第一处理液进行微波消解:120℃升温5min,恒温5min;160℃升温5min,恒温10min;180℃升温5min,恒温10min;冷却;
S13、140℃~160℃条件下去酸,加入水获得待测样品液。
5.如权利要求3或4所述的方法,其特征在于:步骤S2中,所述使用所述待测样品液处理SEQ ID No.3所示脲酶的处理时间为15—25min,优选为20min;处理方式为浸泡。
6.如权利要求2—4中任一所述的方法,其特征在于:检测所述脲酶活性的被抑制程度包括如下步骤:
S21、取经过所述待测样品液或铅离子标准溶液处理过的所述SEQ ID No.3所示脲酶作为处理;取经过纯水处理过的所述SEQ ID No.3所示脲酶作为对照;
S22、将所述处理和所述对照分别按照如下方法处理:加入过量的尿素溶液,34-36℃恒温水浴反应5-10min,加入10%三氯乙酸溶液终止反应;从终止反应的液体中取部分液体加入过量的纳氏试剂,于415nm波长处测定其吸光值;所述处理的吸光值记为A1,所述对照的吸光值记为A0;
S23、按照下式计算获得所述脲酶活性的被抑制程度即脲酶的抑制率I:
脲酶抑制率I(%)=[(A0-A1)/A0]×100%。
7.一种脲酶,其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。
8.权利要求7所述脲酶在检测海洋食品中铅污染的应用。
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