[发明专利]一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物、试剂盒及其分析方法

权利要求书

1.一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，所述的5个磺胺类药基因分别为：int1，sul1，sul2，sul3和sul4；其特征在于，

int1检测引物对：P1核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，P2核苷酸序列如SEQ ID NO：所示；

sul1检测引物对：P3核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，P4核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示；

sul2检测引物对：P5核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示，P核苷酸序列如SEQ ID NO：6所示；

sul3检测引物对：P7核苷酸序列如SEQ ID NO：7所示；P8核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；

sul4检测引物对：P9核苷酸序列如SEQ ID NO：9所示；P10核苷酸序列如SEQ ID NO：10所示。

2.根据权利要求1所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，

所述引物P1和P2其中一条引物的5’端被生物素化；

所述引物P3和P4其中一条引物的5’端被生物素化；

所述引物P5和P6其中一条引物的5’端被生物素化；

所述引物P7和P8其中一条引物的5’端被生物素化；

所述引物P9和P10其中一条引物的5’端被生物素化。

3.根据利要求1所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2，P3和P4，P5和P6，P7和P8，P9和P10未被生物素化的引物的5’端连接有tag序列，所述tag序列能与荧光编码微球中带有的anti-tag序列互补配对。

4.根据权利要求3所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的的多重液相基因芯片引物，其特征在于，所述引物P1和P2、P3和P4、P5和P6、P7和P8，P9和P10这5组引物对中连接的tag序列选自SEQ ID NO：11～15所示的tag序列，且该5组引物对中连接的tag序列互不相同。

5.一种同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片试剂盒，其特征在于，该试剂盒中含有权利要求1～4任一所述引物。

6.根据权利要求5所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片试剂盒，其特征在于，该试剂盒中还含有链霉亲和素-藻红蛋白复合物、5种编码不同荧光色的荧光编码微球。

7.根据权利要求6所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的多重液相基因芯片试剂盒，其特征在于，所述荧光编码微球中还含有与引物中tag序列互补配对的anti-tag序列，编码不同荧光色的荧光编码微球中含有的anti-tag序列互不相同。

8.一种同时检测5个磺胺类耐药基因的的多重液相基因芯片分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)从细菌提取基因组；

2)以提取的细菌基因组为模板，用权利要求1～4任一所述的引物进行PCR扩增；

3)将上步扩增产物、5种编码不同荧光色的荧光编码微球、链霉亲和素-藻红蛋白进行杂交；

4)杂交结束后，通过Luminex系统对杂交产物进行检测分析，确定其病毒的类型；

上述方法用于非疾病的诊断和治疗。

9.根据权利要求8所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的的多重液相基因芯片分析方法，其特征在于：步骤2)中PCR扩增的反应体系为：

步骤2)中PCR扩增的反应程序为：95℃预变性5min；95℃变性30s，60℃退火90s，72℃延伸30s；循环35次；68℃终延伸7min。

10.根据权利要求8所述的同时检测5个磺胺类耐药基因的的多重液相基因芯片分析方法，其特征在于：步骤3)中所述杂交的反应体系和程序为：