[发明专利]EPB42基因在肝癌SBRT疗效评估中的应用

说明书

本发明公开了mRNA EPB42可以作为肝癌立体定向放疗疗效评价的分子标志物。本发明研究证明肝癌立体定向放疗后mRNA EPB42差异表达。本发明提供了一种可用于定量检测血液样本mRNA EPB42表达水平的便捷方法，可用于立体定向放疗后迅速判断肝癌预后以及后续治疗方案的辅助确定，对提高肝癌的生存率，降低死亡率有重要意义。本发明涉及mRNA EPB42、与其对应的分离的多核苷酸、特异性结合的寡核苷酸引物对、mRNA芯片、试剂盒，还涉及实时定量检测血液中对应mRNA的方法。

技术领域

本发明属于分子生物学的应用领域。具体地说，本发明涉及mRNA EPB42、与其对应的分离的多核苷酸、与其特异性结合的寡核苷酸引物对、mRNA芯片、试剂盒，还涉及用所述试剂盒定量检测血液中对应mRNA的方法。

背景技术

原发性肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，其发病率、死亡率分别排名全国恶性肿瘤第4位和第2位。我国肝癌发病率占全球首位，肝癌发病、死亡从高到低依次为西、中、东部地区。乙型、丙型肝炎病毒感染、黄曲霉素、饮酒、非酒精性脂肪肝肝、肥胖等因素是肝癌的危险因素。目前，原发性肝癌的治疗方法多样，其中手术治疗包括根治性外科切除、肝脏移植；非手术治疗，包括局部消融治疗、动脉化疗栓塞、基因分子靶向治疗、系统性化疗、放疗等。手术切除己被证实是使肝癌患者长期存活的最优治疗方案。然而，超过70％的原发性肝癌患者由于肿瘤的部位、大小、数量以及肝功能受损而无法接受肝脏切除手术。因此非手术疗法在肝癌治疗中的地位不言而喻。对于不可手术切除或无法接受外科手术的肝癌患者，NCCN指南推荐外照射放疗作为治疗手段之一。随着计算机、放疗和影像技术的发展，放疗技术的飞速发展使精确放疗成为可能，体现在靶区足够精准、射线剂量集中释放于肿瘤靶区消灭肿瘤，其清除肿瘤的效果近似于“手术刀”般精准。从三维适形放射治疗开始，放射治疗越来越多地被用于原发性肝癌的治疗。目前，原发性肝癌的放射治疗包括一系列先进的技术，如调强放射治疗，体部立体定向放射治疗，粒子治疗等。目前的精准外照射技术可以确保肿瘤局部给予高剂量照射，同时保护剩余正常肝脏组织免受或仅受到低剂量照射。此外，外照射放疗适用于肝脏几乎所有位置的肿瘤。体部立体定向放射治疗(SBRT)，也可作为消融/TACE等治疗手段的替代方案，消融/TACE等治疗失败后的选择方案，或者消融/TACE禁忌证患者的治疗选择。

目前临床应用的超声检查、CT检查、核磁共振检查等手段能从不同角度对肝脏肿瘤的放疗疗效进行判断，然而，到目前为止，放疗疗效的评估主要依赖于局部控制率和转归，如完全治愈CR、部分治愈PR、稳定SD、进展PD等，总生存期(OS)，无病生存期(DFS)，无进展生存期(PFS)等指标，目前尚没有基于个体的、实时评估放疗疗效的生物学指标。因而，寻找出若干具有临床价值的生物标志物，判定其用于评价的效能，是研究人员关注已久的问题。

肿瘤标志物(tumor marker，TM)是指在恶性肿瘤的发生和增殖过程中，因肿瘤细胞的相关基因表达或机体对肿瘤产生反应而异常变化的一类物质。其随着肿瘤的发生和发展进行变化，主要表现为体液中某种正常活性物质的异常增多或者异常物质的出现。因此，肿瘤标志物水平能在一定程度上反映出肿瘤细胞的增殖程度，并在肿瘤的诊断、治疗、预后判断中起到重要的作用。肿瘤标志物检查简便易行，对身体伤害小，仅需要少量血液或者其他体液即可做相关检测。

肿瘤是由环境因素和遗传因素相互作用所导致的一类疾病，从正常组织、癌前病变到恶性肿瘤，多种mRNA参与了肿瘤的发生和发展。mRNA的作用在多种肿瘤中已被证实，但是目前关于mRNA的研究主要集中于肿瘤与正常组织的比较，而已有的文献报道显示组织中的mRNA表达水平与血液中的mRNA表达水平并不相同，两者并非都存在相关关系，这是因为组织中的mRNA表达水平主要反映的是肿瘤局部组织的表达量，而血液中的mRNA则是机体整体的表达情况。对于实施治疗后静脉血中mRNA水平变化是否对癌症预后以及治疗方案的确定有指示作用仍有待研究，尤其是在SBRT治疗后肝癌患者血液中的mRNA的变化尚未见报道。

发明内容