[发明专利]ATP生物荧光lgCA-lgIA标准曲线法评价日化品真菌杀灭效果的方法

说明书

本发明涉及一种日化品真菌杀灭效果的评价方法，检测步骤包括：样品提取及前处理要求；设备选型及试剂、培养基配制；菌种保藏、活化及菌悬液制备；美蓝染色后菌悬液活菌含量C_B血球板计数；ATP浓度对数值lgC_A‑相对荧光强度对数值lgI_A标曲建立及接种菌液活菌C_A标定；中和剂鉴定及杀菌试验；回收液I_A测定及其C_A和T_A推算；杀菌率R和灭菌指数A计算；结果评价；其特别之处在于：应用ATP荧光光度计对以R或A表征的日化品真菌杀灭效果进行精准定量测试。本发明规定回收染菌特定时间后的对照样品和试验样品，测定其I_A并以lgI_A表征和计算R或A；提供结果评价依据。本发明研发的日化品真菌杀灭效果评价的ATP生物荧光lgC_A‑lgI_A标曲法，将以先进的检测技术支撑产品质量提升。

技术领域

本发明涉及日化品的真菌杀灭效果评价方法，具体是一种应用ATP荧光光度计对以杀菌率R或灭菌指数A表征的日化品真菌杀灭效果进行精准定量测试的ATP生物荧光lgC_A-lgI_A标准曲线法，属于日化品杀菌效果评价技术领域。

背景技术

近年来，伴随着人们生活水平提高和消费观念改变,国内市场对洗涤、洗护等日化用品需求量逐年递增；据中商产业研究院发布的《2018-2023年中国快消品行业发展前景及投资机会分析报告》显示，目前中国日化品消费市场整体呈现高于GDP增速的持续增长态势。截止2017年，国内日化行业规模为3233亿元，预计2018年将达3457亿元；受消费需求牵引，具备抗菌消毒功能的中高端日化产品市场年复合平均增长率在10％以上，预计2020年市场规模近1000亿。作为与民生息息相关的细分行业,中国日化用品产业现已进入竞争激烈的转型期；相关质检技术和检测效率逐渐提上日程。

目前，国内外抗菌消毒效果评价技术体系主要针对细菌和真菌，各国抗真菌效果测试方法原理多基于对白色念珠菌进行分离培养的平板计数法，鲜有涉及霉菌者；其中适用于白色念珠菌测试的一是日本工业标准提出的浸渍定量试验方法；二是源自美国纺织业的抑菌环法；三是国际通用的振荡烧瓶法；四是源于美国纺织企业的滴下法。虽然我国已颁布实施《消毒与灭菌效果的评价方法与标准》、GB 15979-2002《一次性使用卫生用品卫生标准》和QB/T 2738-2012《日化产品抗菌抑菌效果的评价方法》等相关标准，但其规定的测试周期在48小时～72小时之间，时间及经济成本高。另外，多年来国际防霉效果评价技术体系基本源自美标、日标和欧标，所涉标准主要包括土埋培养法、琼脂平板法、湿室培养法等；由于霉菌孢子生长过程中形成的菌丝体无法准确计数，只能进行定性判定，无法定量测试；且因霉菌生长周期较长，培养时间至少2周～4周，导致测试周期较长，时间及经济成本高。无论针对白色念珠菌还是霉菌，现有标准方法的实验过程繁琐，技术难度较高；相关操作受人为因素影响大，使得测试误差大，缺乏可比性。近年来，在国际细菌检测技术领域ATP荧光分析法发展日益成熟，与传统平皿法相比检测结果相关性为98％，准确度高且可实现快速检测。受需求牵引，国外抗菌材料性能检测技术研究领域针对当前定量化、快速化和简易化发展趋势，已借鉴ATP荧光分析原理制定ISO 20743:2007-2013《Textiles-Determination ofantibacterial activity of textile products(纺织品-抗菌整理纺织品的抗细菌性能测定)》和ISO 13629-1:2012《Textiles-Determination of antifungal activity oftextile products.Part1Luminescence(纺织品-抗菌整理纺织品的防霉性能测定)》，规定了以样品接种后ATP含量变化表征抗细/霉菌性能的荧光测定法，但其提供的吸收法、转移法和转印法仅适用于具有吸水性且对照样细/霉菌增长值＞0的纺织材料或微孔材料；日化品真菌杀灭效果评估须针对中和效果评价、结果计算公式等关键技术方面形成一整套明确而具体的方法，同时需提供相关测量不确定度评估。另外，该标准方法抗菌性能表征参数较为单一，仅涉及抗菌活性值A，而我国则惯用杀灭率R。