[发明专利]一种腐霉利半抗原及其合成方法和应用

说明书

本发明公开了一种腐霉利半抗原及其合成方法和应用，其合成为（1）以α‑氯代丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯为起始原料合成1,2‑二甲基‑1,2‑环丙烷二羧酸甲酯；1,2‑二甲基‑1,2‑环丙烷二羧酸甲酯再经过水解和分子内缩合后生成1,2‑二甲基环丙烷‑1,2‑二羧酸酐；（2）以3‑氯‑5‑硝基苯酚、化合物3为原料合成带有手臂的中间体，该中间体经还原反应得到中间体B；（3）1,2‑二甲基环丙烷‑1,2‑二羧酸酐与中间体B经过两次缩合反应成环以及一次水解反应得到最终目标物。本发明中，合成的腐霉利半抗原既最大程度保留了腐霉利的特征结构，使得腐霉利半抗原的免疫原性明显增强，又具有可以与载体发生偶联的羧基，为后续建立腐霉利的各种免疫分析方法提供基础。

技术领域

本发明涉及食品安全检测技术领域，特别是涉及了一种腐霉利半抗原及其合成方法和应用。

背景技术

腐霉利（Procymidone）又称速克灵，杀霉利，二甲菌核利等，属于低毒性杀菌剂,兼具保护和治疗作用，持效期较长，耐雨水冲；可用于防治黄瓜、茄子、番茄、洋葱等的灰霉病，莴苣、辣椒的茎腐病，油菜菌核病等，也用于柑橘、香蕉、苹果、梨、桃等水果储存期的防腐保鲜。少量的农药残留不会导致急性中毒，但长期食用农药残留超标的蔬菜，可能对人体健康产生一定的不良影响，近期国家也时常曝出韭菜、蒜薹中腐霉利超标的情况。

现有的腐霉利的检测方法主要有高效液相色谱法（HPLC）、液相-质谱联用（LC-MS）法、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)等。上述检测方法中所用仪器设备操作复杂、成本高、对操作人员技术要求高，且不能立即显示结果，不适用于食品、商检、防疫、畜牧生产者对怀疑对象进行快速的在线检测和监控。

与上述检测方法相比，免疫学检测技术具有经济、快速、技术要点低、操作简便且可实现现场检测等有点。免疫分析检测技术是近年来在环境及食品检测等领域开发出来的一种新型快速准确检测方法，现已逐渐成为世界各国有毒有害残留物快速筛选检测的主要方法之一。

在建立免疫学检测方法并应用该检测方法检测腐霉利残留量时，关键技术在于能够获取到特异性强、灵敏度高的抗体，而要实现这一目标，前提条件就是得合成、制备出合适的腐霉利半抗原。但是，目前，国内还没有针对腐霉利半抗原的相关报道。

发明内容

为了弥补已有技术的缺陷，本发明提供一种腐霉利半抗原及其合成方法和应用，针对腐霉利的结构特点设计出一种腐霉利半抗原的合成方法，合成腐霉利半抗原，用于进一步合成腐霉利人工抗原，诱导免疫动物产生抗体，从而建立腐霉利各种免疫分析方法。

本发明所要解决的技术问题通过以下技术方案予以实现：

一种腐霉利半抗原，其特征在于，其结构式如式（Ⅰ）所示：

其中，n为-CH2基团数目，n为1-5的整数。

本发明还提供上述腐霉利半抗原的合成方法，包括如下步骤：

S1，提供中间体A，所述中间体A具有结构式；

S2，提供中间体B，所述中间体B具有结构式；

S3，将所述中间体A和中间体B进行反应，得到化合物5，所述化合物5具有结构式；

S4，将所述化合物5进行缩合反应，得到化合物6，所述化合物6具有结构式；

S5，将所述化合物6进行水解反应，得到所述腐霉利半抗原。

进一步地，步骤S3包括如下步骤：称取等物质量的中间体A和中间体B，用有机溶剂溶解后进行反应，反应结束后蒸干溶剂，过柱纯化得到所述化合物5；其中，所述有机溶剂为无水吡啶、四氢呋喃和二氯甲烷中的一种或多种；所述反应温度为50-100℃。