[发明专利]F3多肽靶向的纳米有机金属框架材料（nMOFs）及其制备方法

权利要求书

1.一种F3多肽靶向的纳米有机金属框架材料（nMOFs）的制备方法，其特征在于，包含如下步骤：

一、有机配体BDC-N₃的制备：

将2-氨基对苯二甲酸二甲酯分散于水中，冰水浴条件下，滴加浓盐酸，然后滴加亚硝酸钠水溶液，冰水浴至少30分钟后，缓慢滴加叠氮化钠水溶液，室温反应过夜，抽滤，收集固体，纯水洗涤至少3次，并干燥，所得的固体粉末为2-叠氮基对苯二甲酸二甲酯；

将2-叠氮基对苯二甲酸二甲酯溶于四氢呋喃中，并滴加氢氧化钾水溶液，室温反应过夜；TLC监测反应是否结束；反应结束后，旋蒸除去THF，冰水浴条件下，用盐酸水溶液调节PH至3-4，析出固体，随后抽滤所得的白色固体，分别用水和己烷洗涤3-4次，真空干燥，得BDC-N₃；

二、UIO-66-N₃纳米材料的制备：

将步骤一所得的BDC-N₃溶于 N,N-二甲基甲酰胺中得到溶液a，将氯氧化锆八水合物溶于DMF得到溶液b，将溶液a和溶液b混合后加入醋酸，混合均匀，加热，产物用丙酮离心洗涤，收集固体，干燥得UIO-66-N₃ ；

三、DOX/UIO-66-N₃的制备：

将盐酸阿霉素溶于纯水中，加入三乙胺后将混合物进行第一次超声处理，然后加入UIO-66-N₃的纯水分散液进行第二次超声处理，干燥后溶解于PH=7.0的4-羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲溶液中，并用HEPES缓冲溶液洗涤至少三次，随后冷冻干燥，收集样品DOX/UIO-66-N₃；

四、DOX/UIO-66-PEG的制备：

将步骤三所收集的纳米载体DOX/UIO-66-N₃分散于纯水中，超声混合均匀，称取MAL-PEG-Alkyne，随后加水溶解，将上述PEG溶液加入纳米载体DOX/UIO-66-N₃的水分散液中，并混合均匀，加入抗坏血酸钠和7.5%的无水CuSO₄水溶液，避光室温反应过夜；随后将混合物置于截留量15000Da的透析袋中，纯水透析48小时以上，冷冻干燥，产物即为DOX/UIO-66-PEG；

五、DOX/UIO-66-PEG-F3纳米载体的制备：

将F3多肽和TCEP溶解于PH=7.0的HEPES缓冲溶液中搅拌1h-4h，随后加入DOX/UIO-66-PEG，并反应4h-18h，然后在截留分子量15000Da的透析袋中，纯水透析48小时，冷冻干燥，产物即为DOX/UIO-66-PEG-F3纳米载体；

所述步骤一中，2-氨基对苯二甲酸二甲酯分散于水中，2-氨基对苯二甲酸二甲酯和水按照0.5-1g：20-30mL的比例混合；2-氨基对苯二甲酸二甲酯、浓盐酸、叠氮化钠水溶液的比例范围为0.5-1g：10-20mL：10-20mL；所述叠氮化钠水溶液的溶度范围为0.04g/mL-1g/mL；2-叠氮基对苯二甲酸二甲酯、四氢呋喃、氢氧化钾水溶液的比例范围为0.5-1g:10-20mL:10-20mL ；氢氧化钾水溶液的质量分数为4%；

所述步骤二中，BDC-N₃与DMF的比例范围为40-50mg ：2-8mL；氯氧化锆八水合物溶于DMF30-52mg：6-10mL；BDC-N₃与醋酸的比例范围为40-50mg ：800-1000uL；所述加热温度为90℃-120℃，加热时间为18h-24h；产物用丙酮离心洗涤至少3次；

所述步骤三中，DOX·HCL、纯水、TEA、UIO-66-N₃分散液的比例范围为3-6mg：3-5mL：10-20uL：10-40mL；所述UIO-66-N₃分散液是30mg的UIO-66-N₃分散于20mL-50mL的纯水中制备而得；所述步骤三中，第一次超声处理时间为3分钟，第一次超声处理后搅拌至少1小时；第二次超声处理时间为10分钟，第二次超声处理后搅拌至少4小时；

所述步骤四中，纳米载体DOX/UIO-66-N₃、纯水、MAL-PEG-Alkyne、1mol/L抗坏血酸钠和7.5%的无水CuSO₄水溶液的比例范围为3-8mg：7-10mL： 10-15mg：20-25uL：20-30uL；mPEG-Alkyne的水溶液浓度为10-20mg/mL；所述MAL-PEG-Alkyne的水溶液浓度为10-15mg/mL；所述抗坏血酸钠的浓度为1mol/L ；无水CuSO₄水溶液的质量分数为7.5%；

所述步骤五中，F3多肽、TCEP、PH=7.0的HEPES缓冲溶液、DOX/UIO-66-PEG的比例范围为1-5mg：0.2-0.9mg：2-8mL：10-15mg。