[发明专利]一种腐熟固体发酵菌剂及其在农业废弃物中的应用

权利要求书

1.一种腐熟固体发酵菌剂，其特征在于：所述的腐熟固体发酵菌剂包括以酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)、甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)、嗜热脱氮芽孢杆菌(Geobacillus thermodenitrificans)、简单芽孢杆菌(Bacillus simplex)及布氏乳杆菌(Lactobacillus parabuchneri)五种菌组合而成的复合腐熟活性菌剂；其中复合腐熟活性菌剂中每种菌的有效活菌数为1×10⁹cfu/mL，各菌种按1：2：2：1：1的比例混合组合而成。

2.一种制备如权利要求1所述腐熟固体发酵菌剂的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)将保存在0～4℃环境中的各斜面菌种进行活化处理，酿酒酵母菌、甲基营养型芽孢杆菌、嗜热脱氮芽孢杆菌、简单芽孢杆菌及布氏乳杆菌五种菌分别进行试管-摇瓶培养，获得各菌种的一级种子液；

(2)将上述种子液继续进行发酵罐扩大培养，酿酒酵母菌、甲基营养型芽孢杆菌、嗜热脱氮芽孢杆菌、简单芽孢杆菌及布氏乳杆菌分别进行发酵，获得发酵菌液；用显微直接计数法和紫外分光光度法分别检测发酵液体的吸光值和菌群数，判断菌群的生长状况，检测到有效活菌数为1×10⁹cfu/mL时停止培养；

(3)上述各单菌种发酵结束后，将酿酒酵母菌、甲基营养型芽孢杆菌、嗜热脱氮芽孢杆菌、简单芽孢杆菌及布氏乳杆菌按1：2：2：1：1的比例混合，制得腐熟液体复合发酵菌剂；

(4)将步骤(3)中得到的复合菌剂液体按体积比1：2的比例与轻质碳酸钙混合并搅拌均匀，干燥至含水率15％以下；

(5)按照质量浓度1～1.5‰的比例向步骤(4)中得到的复合菌剂中加入保护剂—山梨酸钾，搅拌均匀，即制得腐熟固体发酵菌剂。

3.根据权利要求2所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂的方法，其特征在于，酿酒酵母菌和布氏乳杆菌采用优化的FC2培养基，所述培养基的配方为：2％蔗糖；0.5％酵母膏；0.3％蛋白胨；0.2％磷酸氢二钠；接种量为1～2％，150～200rpm，培养24～36h。

4.根据权利要求2所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂的方法，其特征在于，甲基营养型芽孢杆菌和嗜热脱氮芽孢杆菌采用优化的YM1培养基，所述培养基的配方为：0.5％玉米浆；0.2％磷酸氢二钠；1％蔗糖；接种量为1～2％，150～200rpm，培养24～36h。

5.根据权利要求2所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂的方法，其特征在于，简单芽孢杆菌采用LBG培养基，所述LBG培养基的配方为：0.5％葡萄糖，1％蛋白胨，0.5％酵母膏，1％氯化钠；接种量为1～2％，150～200rpm，培养24～36h。

6.根据权利要求2所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂的方法所制得的腐熟固体发酵菌剂在农业废弃物腐熟处理中的应用。

7.根据权利要求6所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂在农业废弃物腐熟处理中的应用，其特征在于，所制得的腐熟固体发酵菌剂可应用的农业废弃物为80％牛粪和20％的秸秆。

8.根据权利要求7所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂在农业废弃物腐熟处理中的应用，其特征在于，20％的秸秆为棉花秸秆。

9.根据权利要求7所述的一种制备腐熟固体发酵菌剂在农业废弃物腐熟处理中的应用，其特征在于，20％的秸秆为核桃秸秆。