[发明专利]一种检测非洲猪瘟病毒的冻干微芯片、试剂盒及方法在审
申请号: | 201910065410.7 | 申请日: | 2019-01-18 |
公开(公告)号: | CN111455095A | 公开(公告)日: | 2020-07-28 |
发明(设计)人: | 倪建强;王传彬;刘洋;杨林;徐琦;宋晓晖;顾小雪;李硕;刘玉良;亢文华 | 申请(专利权)人: | 中国动物疫病预防控制中心(农业农村部屠宰技术中心) |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6837;C12N15/11 |
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地址: | 100125 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 非洲 猪瘟 病毒 冻干微 芯片 试剂盒 方法 | ||
1.一种引物探针组,由引物F、引物R和探针P组成;
所述引物F为如下(a1)或(a2):
(a1)序列表的序列1所示的单链DNA分子;
(a2)将序列1经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列1具有相同功能的DNA分子;
所述引物R为如下(a3)或(a4):
(a3)序列表的序列2所示的单链DNA分子;
(a4)将序列2经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加且与序列2具有相同功能的DNA分子;
所述探针P,一个末端具有荧光报告基团,另一个末端具有荧光淬灭基团,核苷酸序列为如下(a5)或(a6):
(a5)如序列表的序列3所示;
(a6)如将序列3经过一个或几个核苷酸的取代和/或缺失和/或添加所示。
2.权利要求1所述引物探针组的应用,为如下(b1)、(b2)、(b3)、(b4):
(b1)鉴定非洲猪瘟病毒;
(b2)制备用于鉴定非洲猪瘟病毒的试剂盒;
(b3)检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒;
(b4)制备用于检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒的试剂盒。
3.一种检测猪组织及猪血饲料制品中非洲猪瘟病毒的冻干微芯片,包括权利要求1所述引物探针组;所述冻干微芯片的功能为如下(c1)、(c2):
(c1)鉴定非洲猪瘟病毒;
(c2)检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒。
4.一种用于检测猪组织及猪血饲料制品中非洲猪瘟病毒的冻干微芯片荧光PCR试剂盒,包括权利要求2所述冻干微芯片和稀释液、矿物油,还包括阴性对照和阳性对照;所述阴性对照为RNase Free dH2O;所述阳性对照为含有非洲猪瘟病毒的基因组DNA的溶液。所述试剂盒的功能为如下(c1)、(c2):
(c1)鉴定非洲猪瘟病毒;
(c2)检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒。
5.权利要求3所述冻干微芯片或权利要求4所述试剂盒的应用,为如下(c1)、(c2):
(c1)鉴定非洲猪瘟病毒;
(c2)检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒。
6.一种鉴定是否为非洲猪瘟病毒方法,包括如下步骤:采用实施例1任一所述的冻干微芯片,和/或,实施例2任一所述的试剂盒对待测样品进行荧光PCR扩增。如果检测结果为阳性、待测病毒为或候选为非洲猪瘟病毒,如果检测结果为阴性、待测病毒为或候选为非非洲猪瘟病毒。
7.一种检测猪组织及猪血饲料制品中是否含有非洲猪瘟病毒的方法,包括如下步骤:采用实施例1任一所述的冻干微芯片,和/或,实施例2任一所述的试剂盒对待测样品进行荧光PCR扩增。如果检测结果为阳性、待测病毒为或候选为非洲猪瘟病毒,如果检测结果为阴性、待测病毒为或候选为非非洲猪瘟病毒。
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