[发明专利]实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法在审
| 申请号： | 201910059612.0 | 申请日： | 2019-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN110452953A | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 王桂文;张宇;苗振槟;张鹏飞;黄旭华;王晓春 | 申请（专利权）人： | 王桂文;广西科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/02 | 分类号： | C12Q1/02;G01N21/65 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 530007广西壮族*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 微孢子虫孢子 发芽 实时监测 发芽过程 孢子 获知 实时动态分析 研究微生物 单个孢子 光学成像 光学手段 拉曼光谱 生理机制 直观监测 异质性 染色 验证 分析 | ||
【权利要求书】：
1.一种实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
包括以下步骤：
（1）步骤一：采用倒置显微镜成像，附加相差附件；
（2）步骤二：采用高分子材料将大量单个孢子固定；
（3）步骤三：人工方法刺激孢子发芽并实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程。
2.根据权利要求1所述实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
显微镜锚定高速相机。
3.根据权利要求所述实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
孢子人工发芽过程被高速相机实时记录，记录速度为每秒5~30帧。
4.根据权利要求3所述实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
发芽过程记录的大量单个孢子亮度变化，通过Matlab自编程序读取灰度值，并绘制亮度-时间曲线。
5.根据权利要求4所述实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
发芽过程孢子亮度变化动态经过单细胞拉曼光谱实时监测验证。
6.根据权利要求5所述实时监测单个微孢子虫孢子发芽动态和过程的方法，其特征在于，
通过780 nm激光俘获单个微孢子虫孢子，俘获的孢子的拉曼信号由同一束激光激发；
采集俘获孢子的发芽过程的拉曼光谱，建立单个孢子发芽过程特征峰强度（孢内物质含量）-时间曲线；
建立发芽过程孢子亮度变化动态与拉曼特征峰强度（孢内物质含量）的对应关系。
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