[发明专利]用于体外受精技术的基于分子的小鼠胚胎分析的方法和质量控制

说明书

本发明提供一种定量评价体外受精中使用的产品的方法。本发明还公开了一种用于临床辅助生殖技术(ART)的改进的质量控制分析方法。

本申请是申请号为201480024414.6、2015年10月30日进入中国国家阶段、申请 日为2014年03月14日、发明名称为“用于体外受精技术的基于分子的小鼠胚胎分析 的方法和质量控制”的发明专利申请的分案申请。

相关专利申请的交叉引用

本申请要求2013年3月14日提交的、名称为“用于体外受精技术的基于分子的 小鼠胚胎分析的方法和质量控制”的美国临时专利申请第61/783,557号的优先权，该 美国临时申请的全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本发明涉及评价细胞生物学(例如，体外受精)中使用的产品的方法。本发明 还公开了用于临床辅助生殖技术(ART)的质量控制分析方法。

背景技术

体外受精(IVF)实验室在治疗不能生育的夫妻方面发挥重要作用。确保IVF实 验室中合适的质量控制(QC)对于任何IVF项目的成功而言都是至关重要的，因为 实验室环境可改变所产生的胚胎的质量。最优的培养基和稳定的环境对于人胚胎体 外成功发育而言是必需的。胚胎学实验室的最终作用是在女性生殖道之外的环境中 保持配子和胚胎的固有生存能力。植入前胚胎发育的动态性是独一无二的，因为胚 胎不像体细胞培养物那样，胚胎在形态和功能方面不断且快速地发生变化(Leese 1991；Bavister 1995)。

在发育过程中，植入前胚胎仅在几天的过程中就在母本转录本的基因控制下从新陈代谢静止的未分化的单个细胞快速转变成动态的多细胞胚胎，该动态的多细胞 胚胎已发育出了自我平衡机制及其自身功能基因组(Leese 1991；Lane 2001；Gardner etal.2005)。早期胚胎依赖于基于丙酮酸酯的代谢并且仅依赖于线粒体氧化磷酸化 作用产生能量；与单细胞生物体相似，所述早期胚胎缺乏很多用于pH和渗透控制的 关键调节作用。在8细胞期至16细胞期(取决于物种)进行压缩之后，代谢控制变成 高度糖酵解代谢。同时，随着胚胎生理学变得更加类似于体细胞，在其他细胞机制 的功能复杂性方面也存在显著的转变。该显著的转变是早期胚胎及其在植入前发育 的后期阶段的后续发育过程中自我平衡调节的最初的天然特性，这种最初的天然特 性在实验室中产生很大的挑战。维持有利的体外环境对于最大化生存能力以及促进 不断发育而言是必需的。

相对于生殖道中遭遇的“正常”条件，培养物的发育过程中胚胎周围的环境的 扰动导致胚胎生存能力降低以及发育受损。如下文所讨论的，本领域需要用于测试 在人IVF中使用的物质的胚胎毒性以及生长促进因素和抑制因素的客观、灵敏且可 重复的方法和分析。

发明内容