[发明专利]一种应用PEG水凝胶的复合瓣膜支架及其制备方法和其应用

权利要求书

1.一种应用PEG水凝胶的复合瓣膜支架的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一、将脱细胞猪主动脉瓣浸泡在含巯基化试剂的PBS缓冲液中，于室温下孵育1.2-2.5h；

步骤二、将步骤一中脱细胞猪主动脉瓣取出后用PBS缓冲液清洗三遍，以终止反应，再将其浸泡在盐酸羟胺溶液中，于室温下孵育2.5-3.5h后得到巯基化脱细胞猪主动脉瓣；

步骤三、将步骤二中巯基化脱细胞猪主动脉瓣用PBS缓冲液清洗三遍，以清洗去除残余的盐酸羟胺；

步骤四、使用4-Arm-PEG-MAL和基质金属蛋白酶底物肽按马来酰亚胺基与巯基比例为3:1溶解于三乙醇胺缓冲液中，制成预成胶液；

步骤五、将预成胶液涂布于巯基化脱细胞猪主动脉瓣上，并于37℃下交联反应2.8-3.6h，再用纯水清洗除去残余的试剂，即得一种复合瓣膜支架。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤一PBS缓冲液中巯基化试剂的质量浓度为1.7-2.2mg/mL。

3.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，步骤一中巯基化试剂为N-琥珀酰亚胺基-S-乙酰硫基乙酸酯。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤二中盐酸羟胺溶液浓度为0.5M。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤四中4-Arm-PEG-MAL分子量为5-20KPa，基质金属蛋白酶底物肽的序列为Ac-GCRD-GPQGIWGQDGCG-NH₂。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤四中三乙醇胺缓冲液的pH为7.4、浓度为4mM。

7.根据权利要求2-6任一项所述的制备方法，其特征在于，步骤一至步骤三中PBS缓冲液为含1MEDTA、pH为7.5的PBS缓冲液。

8.一种应用PEG水凝胶的复合瓣膜支架，其特征在于，根据权利要求1-7任一项所述制备方法制备获得。

9.权利要求8所述应用PEG水凝胶的复合瓣膜支架作为组织工程心脏瓣膜支架材料用于再生医学的用途。