[发明专利]一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

S1、准备原材料：采集新鲜动物皮，洗净后切片备用；

S2、去脂处理：将切好的动物皮碎片进行去脂处理得到去脂动物皮；

S3、去腥处理：对去脂动物皮先进行臭氧水喷淋，然后进行去腥处理；

S4、打浆处理：将去腥处理后的动物皮加入3-5倍动物皮质量的去离子水，进行打浆，得到浆液；

S5、一次酶解处理：往浆液中加入内切蛋白酶进行酶解，得到第一胶原多肽液；

S6、二次酶解处理：将第一胶原多肽液加入风味蛋白酶进行脱苦酶解，酶解后灭酶活性，得到第二胶原多肽液；

S7、离心处理：将第二胶原多肽液置于离心机中离心，去除沉淀取上清液，其中离心转速为2000-3000r/min；

S8、脱色处理：往上清液中加入活性炭，搅拌混合10-15min后，静置30-40min，滤去活性炭得到脱色液；

S9、萃取处理:对脱色液进行超临界二氧化碳萃取脱腥脱臭脱色处理，萃取条件为压力30-35MPa、温度50-60℃，萃取时间为1-2h，得到萃取液；

S10、浓缩处理:对萃取液分别采用截留分子量为1-lOKDa的超滤膜包进行分段截留，以得到不同截留分子量的梯度胶原多肽液及胶原多肽分子。

2.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述步骤S2中，去脂处理的过程具体为：将动物皮碎片置入干净的蒸煮锅内，加入3-4倍动物皮碎片质量的去离子水，加热至50-60℃，超声作用下蒸煮20-30min，取出动物皮碎片得到去脂动物皮。

3.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述步骤S3中，臭氧水喷淋的臭氧浓度为1.0-3.0mg/L，臭氧水喷淋时间为2-3min。

4.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述去腥处理的过程为：将臭氧处理后的动物皮放入50-60℃的热水中浸泡5-10min，然后将动物皮取出，置入去腥液中浸泡20-40min，然后与碳酸氢钠粉和水一起加入甩洗机中，进行甩洗20-30min，其中碳酸氢钠粉和水与加入甩洗机中的动物皮重量比为1:1.6:19；然后从甩洗机中取出动物皮置于流动水下冲洗5-8min，将冲洗后的动物皮放入50-60℃的热水中浸泡，10-15min后捞出沥干，完成去腥处理。

5.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述去腥液为乙醇、氯化钠、柠檬酸的混合液，乙醇、氯化钠和柠檬酸的体积比为1:3:2。

6.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述步骤S5中，一次酶解处理的具体过程为：调节浆液pH值为6.5-7.5、温度为40-65℃，加入内切蛋白酶，辅助微波酶解2-3h，内切蛋白酶的用量为动物皮重量的0.5-1.5％。

7.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述内切蛋白酶为胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、菠萝蛋白酶中的一种或多种的组合物。

8.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述步骤S6中，二次酶解处理时控制第一胶原多肽液pH为6.0-6.5，酶解温度为70-80℃，酶解时间为20-40min。

9.根据权利要求1所述的一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的制备方法，其特征在于，所述步骤S8中，加入的活性炭的量为上清液质量的2-4％。

10.一种梯度胶原蛋白及胶原多肽分子的应用，其特征在于：在化妆品、护肤品中的应用；在滋补保健品中的应用；在骨科术后恢复药剂中的应用；在烧伤术后恢复药剂中的应用；在预测肝脏纤维化测量中的应用；在人工血管和瓣膜的支架材料中的应用；用于创伤中的局部治疗及伤口修复的控制感染；在眼科中抗感染和青光眼治疗中的应用；在食品添加剂中的应用；在饲料中的应用。