[发明专利]使用磷酸化的TBeta4和其他因子生成人诱导多能干细胞

说明书

本发明提供使用外源Tβ4、外源Sox2和外源Oct4在非胚性和/或体细胞中诱导多能性的组合物和方法。诱导多能干细胞可以是类人猿或鼠。外源Tβ4可以是磷酸化的。外源Tβ4、外源Sox2和外源Oct4中的至少一种可以与细胞膜穿透部分和/或细胞核靶向部分偶联，从而使它们到达细胞核。另外，诱导多能干细胞在至少100次传代中保持多能性。

本申请要求于2017年8月25日提交的第62/550,337号美国临时专利申请以及于2018年7月24日提交的标题为“使用磷酸化的TBeta4和其他因子生成人诱导多能干细胞”的美国专利申请16/044,142的利益和优先权，其全部内容通过引用并入本申请。

本文讨论的这些和所有其他外部材料通过引用整体并入本文。当术语的定义或使用在并入的参考文献中与本文提供的术语的定义不一致或相反时，适用本文提供的该术语的定义，而参考文献中该术语的定义不适用。

技术领域

本发明的技术领域是生成人诱导多能干细胞的组合物和方法。

背景技术

以下背景讨论包括可用于理解本发明的信息。不承认本文提供的任何信息是现有技术或与当前要求保护的发明有关，或明确或隐含引用的任何出版物均为现有技术。

目前针对治疗退行性疾病存在需求，而胚胎干细胞植入已显示出一些希望。(OlleLindvallZaal Kokaia,Stem cells for the treatment of neurological disorders,441 NATURE 1094-96,2006)。但是，胚胎干细胞的使用存在争议。在2006年，Yamanaka等人报道了使用四种转录因子Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klft从小鼠胚胎成纤维细胞中诱导多能干细胞的产生。azutoshi TakahashiShinya Yamanaka(Induction of pluripotent stemcells from mouse embryonic and adult fibroblast cultures by defined factors,126 CELL 663-76,2006)。在2007年，这些转录因子被用于诱导人类成纤维细胞的多能干细胞。(Kazutoshi Takahashi et al.,Induction of Pluripotent Stem Cells from AdultHuman Fibroblasts by Defined Factors,131 CELL 861-72,2007)。

诱导多能干细胞具有与胚胎干细胞相似的特性，并且还可以发展成退行性疾病疗法。另外，为了研究疾病进展，可以通过对健康和患病个体的体细胞进行程序重调来生成iPSC(诱导多能干细胞)。然后可以通过引入或纠正可能引起疾病的突变，而对iPSC进行基因修饰。然后将iPSC分化为目标细胞类型。(Yu Fen Samantha Seah et al.,InducedPluripotency and Gene Editing in Disease Modelling:Perspectives andChallenges,16 INT.J.MOL.SCI.28614-34,2015)。

然而，几个问题阻止了iPSC在治疗中的广泛使用。其中一个问题是肿瘤的形成，因为Yamanaka转录因子促进肿瘤发生，从而使植入的细胞不能正常运转。此外，由于使用病毒载体进行永久性基因组修饰，我们无法预测后果。

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