[发明专利]稳定化蛋白质脱酰胺酶干燥组合物在审
申请号: | 201880057099.5 | 申请日: | 2018-09-06 |
公开(公告)号: | CN111051507A | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
发明(设计)人: | 小原平圭 | 申请(专利权)人: | 天野酶制品株式会社 |
主分类号: | C12N9/80 | 分类号: | C12N9/80 |
代理公司: | 北京汇思诚业知识产权代理有限公司 11444 | 代理人: | 龚敏;王刚 |
地址: | 日本国爱知县名*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 稳定 蛋白质 脱酰胺酶 干燥 组合 | ||
本发明提供一种通过干燥酶组合物的组成上的研究而提高蛋白质脱酰胺酶组合物的稳定性的技术。在干燥酶组合物中,通过使氯化镁与蛋白质脱酰胺酶共存,或者,调整为使其以1w/v%的浓度溶解于水中时的pH为2以上且小于5,可提高蛋白质脱酰胺酶干燥组合物的稳定性。
技术领域
本发明涉及稳定化的蛋白质脱酰胺酶干燥组合物。
背景技术
蛋白质脱酰胺酶是分配EC3.5.1.44作为EC编号的酶,其将蛋白质中的谷氨酰胺、天冬酰胺的酰胺基水解,变换为谷氨酸、天冬氨酸而使氨游离。蛋白质脱酰胺酶可应用于提高蛋白质的功能性(溶解性、乳化特性、泡末特性、凝胶特性等),提高小麦面筋的面团的延展性,降低小麦过敏原诱发性,提高来自农产品的蛋白质的提取效率,提高蛋白质溶液中的钙溶解性等各种用途,是产业上的利用性高的酶。
蛋白质脱酰胺酶广泛存在于自然界。作为最知名的酶,可举出专利文献1、2中记载的来自微生物的蛋白质谷氨酰胺酶。非专利文献1报告存在从发芽中的小麦、四季豆、南瓜种子中将蛋白质中的谷氨酰胺残基进行脱酰胺的酶。另外,在非专利文献2中报告在细菌(Bacillus circulans)的菌体内将肽中的谷氨酰胺残基进行脱酰胺化的酶即肽谷氨酰胺酶的存在。此外,非专利文献2中记载了蛋白质脱酰胺酶溶液的pH稳定性为pH5至9。
应予说明,作为作用于酰胺基的酶,比蛋白质脱酰胺酶更早知道的酶,可举出谷氨酰胺转移酶。已知谷氨酰胺转移酶是分配EC2.3.2.13作为EC编号的酰基转移酶,蛋白质脱酰胺酶在结构和特性等方面是与谷氨酰胺转移酶完全不同的酶。
在将酶用作产业用酶剂的情况下,保存稳定性变得重要。作为用于维持充分的保存稳定性的手段,可举出因突变导致的酶自身性质的改性、以及稳定剂的添加等。
例如,在专利文献3中记载了为了改良稳定性而在蛋白质脱酰胺酶中导入特定的突变的突变型蛋白质脱酰胺酶的设计。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2000-50887号公报
专利文献2:日本特开2001-218590号公报
专利文献3:国际公开第2010/029685号
非专利文献
非专利文献1:Vaintraub,I.A.,Kotova,L.V.&Shaha,R.(1996)Proteindeamidases from germinating seeds.Physiol.Plantarum.96,662-666.
非专利文献2:Kikuchi,M.,Hayashida,H.,Nakano,E.&Sakaguchi K.(1971)Peptidoglutaminase.Enzymes for selective deamidation of γ-amido of peptide-bound glutamine.Biochemistry 10,1222-1229.
发明内容
(发明要解决的课题)
关于蛋白质脱酰胺酶,如专利文献3所示已知通过向酶自身导入突变来改良稳定性。然而,尚不知道通过在酶组合物的组成上的研究来改良蛋白质脱酰胺酶的稳定性的方法。
因此,本发明的目的在于提供一种通过在酶组合物的组成上的研究来提高蛋白质脱酰胺酶组合物的稳定性的技术。
(用于解决课题的技术方案)
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