[发明专利]难以表达的蛋白质的多位点特异性整合细胞在审
| 申请号： | 201880026281.4 | 申请日： | 2018-02-17 |
| 公开（公告）号： | CN111372946A | 公开（公告）日： | 2020-07-03 |
| 发明（设计）人： | M·福瑞;R·J·杨;M·莫法特;G·F·卡斯帕森;H·L·琼斯;L·张 | 申请（专利权）人： | 隆萨有限公司;弗埃塞股份有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C12N15/90 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 余颖;钱文宇 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 难以 表达 蛋白质 多位点 特异性 整合 细胞 | ||
1.一种包含至少两种不同的重组靶位点(RTS)的哺乳动物细胞，其中两种RTS在染色体上整合于NL1基因座或NL2基因座内。
2.如权利要求1所述的细胞，其包含两种不同的RTS。
3.如权利要求1所述的细胞，所述两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL1基因座内。
4.如权利要求1所述的细胞，所述两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL2基因座内。
5.如权利要求1所述的细胞，其包含四种不同的RTS。
6.如权利要求1所述的细胞，其中，所述四种不同的RTS在染色体上整合于相同的基因座。
7.如权利要求6所述的细胞，其中，两种RTS在染色体上整合于单独的基因座。
8.如权利要求7所述的细胞，其中，所述单独的基因座是Fer1L4基因座。
9.如权利要求5所述的细胞，其中，两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL1基因座内，而两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL2基因座内。
10.如权利要求1所述的细胞，其包含六种不同的RTS。
11.如权利要求10所述的细胞，其中，至少四种不同的RTS在染色体上整合于相同的基因座。
12.如权利要求10所述的细胞，其中，至少两种RTS在染色体上整合于单独的基因座。
13.如权利要求12所述的细胞，其中，所述单独的基因座是Fer1L4基因座。
14.如权利要求10所述的细胞，其中，至少两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL1基因座内，而至少两种不同的RTS在染色体上整合于所述NL2基因座内。
15.如权利要求1-14中任一项所述的细胞，其中，所述RTS中的至少一种是frt位点，lox位点，rox位点或att位点。
16.如权利要求1-15中任一项所述的细胞，其中，所述RTS中的至少一种选自SEQ IDNO:1-30。
17.如权利要求1-16中任一项所述的细胞，其中，所述哺乳动物细胞是小鼠细胞，人细胞，中国仓鼠卵巢(CHO)细胞，CHO-K1细胞，CHO-DXB11细胞，CHO-DG44细胞，包括各种变体的CHOK1SVTM细胞，包括各种变体的CHOK1SV GS-KOTM(谷氨酰胺合成酶敲除)细胞，HEK细胞，包括粘附和悬浮适应型变体的HEK293细胞，HeLa细胞，或HT1080细胞。
18.如权利要求17所述的细胞，其中，所述细胞是包括粘附和悬浮适应型变体的HEK293细胞或HEK细胞。
19.如权利要求1-18中任一项所述的细胞，还包含感兴趣的第一基因，其中，所述感兴趣的第一基因整合在染色体上。
20.如权利要求19所述的细胞，其中，所述感兴趣的第一基因包含报告基因，选择基因，治疗意义的基因，辅助基因或其组合。
21.如权利要求20所述的细胞，其中，所述治疗意义的基因包含编码难以表达的蛋白质的基因。
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