[发明专利]测定治疗性细胞组合物的效力的方法和组合物

说明书

本公开提供了用于评估促进细胞和/或alpha beta TCR+T细胞的效力的效力测定法。

对相关申请的交叉引用

本申请要求2017年3月6日提交的美国临时申请序列号62/467,420的权益，其公开通过引用整体并入本文。

技术领域

一般地，本公开涉及用于确定治疗性细胞组合物的效力的方法和组合物。

发明背景

效力测定法旨在通过检测或测量与一种或多种生理特性有关联的一种或多种生物标志物来预测细胞组合物的治疗活性。然而，由于作用的治疗机制在治疗性细胞组合物之间可以有所变化，因此可能难以鉴定与相关生物或生物物理特性可再现地关联的生物功能。另外，由于作用的治疗机制可以依赖于复杂的生物途径，因此确定哪些产物属性与确定效力最相关可能尤其具有挑战性。尽管如此，开发反映细胞组合物治疗特性并提供生产批次间一致性的可靠测量的效力测定法极其重要。

本公开描述了用于评估移植促进细胞(FC)和/或alpha beta TCR+T细胞的治疗功效的新效力测定法。

发明概述

本文描述了用于评估促进细胞和/或alpha beta TCR+T细胞的效力的方法和组合物。

在一方面，提供了确定包括促进细胞(FC)和/或alpha beta TCR+T细胞的样品的效力的方法。此类方法典型地包括使包括FC和/或alpha beta TCR+T细胞的样品与促有丝分裂刺激物接触；和确定样品中核糖体S6蛋白被磷酸化(pS6)的FC和/或alpha beta TCR+T细胞的数量。如本文所述，样品中pS6被磷酸化的FC和/或alpha beta TCR+T细胞的数量分别指示了样品中FC和/或alpha beta TCR+T细胞的效力。

代表性的促有丝分裂刺激物包括但不限于，佛波醇12-肉豆蔻酸酯13-乙酸酯(PMA)与离子霉素、植物血凝素(PHA)、伴刀豆球蛋白A(conA)和商陆有丝分裂原(pokeweedmitogen，PWM)。在一些实施方案中，使样品与促有丝分裂刺激物接触约5分钟至约60分钟(例如约20分钟至约30分钟)的时间段。

在一些实施方案中，样品包括约100,000至约2,000,000个FC和/或alpha betaTCR+T细胞。在一些实施方案中，使用针对pS6的荧光标记的抗体确定样品中pS6被磷酸化的FC和/或alpha beta TCR+T细胞的数量。在一些实施方案中，使用FACS检测荧光标记的抗体的结合。

在一些实施方案中，方法在冷冻FC和/或alpha beta TCR+T细胞之前进行。在一些实施方案中，方法在已冷冻的FC和/或alpha beta TCR+T细胞上进行。

在一些实施方案中，样品中至少30％的FC是pS6+。在一些实施方案中，样品中至少30％的alpha beta TCR+T细胞是pS6+。

在另一个方面，提供了确定FC和/或alpha beta TCR+T细胞的治疗剂量的方法。此类方法典型地包括提供包括FC和/或alpha beta TCR+T细胞的细胞样品；确定细胞样品的效力。如本文所述，细胞样品的效力可以是FC和/或alpha beta TCR+T细胞的治疗剂量的指示。

在另一个方面，制品，其包括针对pS6的磷酸化形式的抗体和以下的至少一种：针对CD3的抗体、针对CD8的抗体和针对alpha beta TCR的抗体。

在一些实施方案中，制品包括针对pS6的磷酸化形式的抗体、针对CD3的抗体和针对alpha beta T细胞受体(TCR)的抗体。在一些实施方案中，制品包括针对pS6的磷酸化形式的抗体和针对CD8的抗体。在一些实施方案中，制品包括针对pS6的磷酸化形式的抗体、针对CD3的抗体、针对CD8的抗体和针对alpha beta TCR的抗体。