[发明专利]一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法

说明书

本发明涉及分子检测技术领域，且公开了一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法，步骤一：PCR引物设计与合成，根据NCBI上预测的猪ACVR1基因序列，在NCBI中设计用于PCR的引物，引物稀释后终浓度为（10pmol/L）；步骤二：PCR扩增，以步骤一中提取的肌肉组织DNA为模板，利用引物进行PCR扩增，PCR扩增的反应程序；步骤三：扩增反应体系。该检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法，通过在PCR产物中引入了内对照酶切位点，克服了所用快酶NdeI切割PCR产物的效率相对较低，容易造成酶切不完全的弊端，可根据酶切产物的电泳图谱识别酶切不完全的情形，并且在酶切不完全的情况下，仍可根据各基因型的特征条带的状况来判别基因型，确保了基因型判别的准确性。

技术领域

本发明涉及分子检测技术领域，具体为一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法。

背景技术

ACVR1基因是胚胎发育和生长必不可少的，涉及了多细胞和组织类型，如肌肉、骨骼和神经系统等，并且在小鼠发育过程具有时空表达特异性。研究表明敲除ACVR1基因使得小鼠胚胎在发育早期就出现阻滞现象，因此研究ACVR1基因在组织/器官发育中的功能时多采用条件突变(conditional mutants)。目前对ACVR1基因的研究主要集中在进行性肌肉骨化症(Fibrodysplasia Ossificans Progressiva，FOP)以及神经胶质瘤(DiffuseIntrinsic Pontine Glioma，DIPG)等疾病的研究上，并揭示了与两者相关的关键突变。

目前，检测ACVR1基因rs324003968的基因型的方法有PCR-RFLP法、测序法、荧光PCR、基因芯片等。除了PCR-RFLP法外，其他方法均需昂贵设备或试剂、素质要求高的人员、繁琐的操作、高的检测成本。PCR-RFLP法操作简单，对仪器设备要求低，便于应用。因此，本发明提出了一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法。

发明内容

（一）解决的技术问题

针对现有技术的不足，本发明提供了一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物和方法具备通过在PCR产物中引入了内对照酶切位点，克服了所用快酶NdeI切割PCR产物的效率相对较低，容易造成酶切不完全的弊端，可根据酶切产物的电泳图谱识别酶切不完全的情形，并且在酶切不完全的情况下，仍可根据各基因型的特征条带的状况来判别基因型，确保了基因型判别的准确性的优点，解决了目前ACVR1基因SNP位点基因分型的方法要求素质要求高的人员、繁琐的操作、高的检测成本的问题。

（二）技术方案

为实现上述的目的，本发明提供如下技术方案：一种检测ACVR1基因SNP位点基因分型PCR引物，具体如下：

ACVR1基因PCR引物序列信息:

>15dna:chromosome chromosome:Sscrofa10.2:15:72093370:72093970:1