[发明专利]METTL3基因的应用及其检测方法

说明书

本发明涉及一种m6A甲基化修饰过程中关键基因(METTL3)的检测及其应用，根据提取的总RNA序列，设计并合成特异性PCR引物，利用real‑time PCR技术，发现METTL3在类风湿关节炎患者外周血单个核细胞中的表达显著上升，并且与类风湿关节炎的疾病活动性指标CRP、ESR呈明显正相关关系，故METTL3基因可应用于制备类风湿关节炎的辅助诊断、治疗或者预后评估的制剂；本发明同时设计并合成特异性过表达该基因的Lv‑METTL3序列，能够通过调控NF‑κB信号通路显著抑制巨噬细胞的增殖及LPS所诱导的巨噬细胞的炎症反应，可成为类风湿关节炎的分子靶向治疗工具。

技术领域

本发明属于风湿病分子生物学领域，具体涉及一种m6A甲基化中关键基因METTL3的表达、应用及其检测方法，具体而言，本发明具体涉及METTL3基因在制备类风湿关节炎辅助诊断制剂、分子靶向治疗制剂或者预后评估制剂中的应用。

背景技术

类风湿关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)，是一种常见的病因未明的炎症性、系统性自身免疫性疾病，以对称性手足小关节慢性炎症为主要临床表现，其主要病理特征是滑膜炎和血管炎(Scott DL,et al.Rheumatoid arthritis.Lancet.2010；376:1094-108.)。RA通常会造成关节以外的脏器损伤，例如，肺组织纤维化、心包炎、皮肤出现类风湿结节等(Turesson C.Extra-articular rheumatoid arthritis.Curr OpinRheumatol.2013；25:360-366.)。RA具有高度的致畸性和致残性，病程后期严重影响患者的生活品质。RA的发病机制不明，可能与传染、遗传、性激素分泌等有关(Glant TT,etal.Epigenetics in the pathogenesis of rheumatoid arthritis.BMC Med.2014；12:35；Salemi S,et al.Could early rheumatoid arthritis resolve afterperiodontitis treatment only？:case report and review of theliterature.Medicine(Baltimore)2014；93:e195；Ayeldeen G,et al.Possible use ofmiRNAs-146a and -499 expression and their polymorphisms as diagnostic markersfor rheumatoid arthritis.Mol Cell Biochem.2018；449:145-156.)。尽快缓解患者的炎性症状，缓解疼痛，控制病情活动，延缓疾病的进展，减少疾病对患者造成致畸以及致残的伤害是RA治疗的关键。但是，目前RA的治疗药物包括改变病情抗风湿药、糖皮质激素等缺乏靶向性、针对性，长期服药副作用大，病人身体及心理负担重(Westhovens R,etal.Clinical efficacy and safety of abatacept in methotrexate-naive patientswith early rheumatoid arthritis and poor prognostic factors.Ann RheumDis.2009；68:1870-1877；Bathon J,et al.Sustained disease remission andinhibition of radiographic progression in methotrexate-naive patients withrheumatoid arthritis and poor prognostic factors treated with abatacept:2-year outcomes.Ann Rheum Dis 2011；70:1949-1956；Goekoop-Ruiterman YP,etal.Clinical and radiographic outcomes of four different treatment strategiesin patients with early rheumatoid arthritis(the BeSt study):A randomized,controlled trial.Arthritis Rheum 2008；58:S126-35；Goekoop-Ruiterman YP,etal.Comparison of treatment strategies in early rheumatoid arthritis:arandomized trial.Ann Intern Med 2007；146:406-415.)。因此，寻找RA早期诊断、靶向治疗和预后评估的生物标记物分子意义深重。