[发明专利]一种同时检测外泌体膜蛋白和mRNA的方法

权利要求书

1.一种同时检测靶基因的外泌体膜蛋白和mRNA的方法，所述的靶基因为PDL1和GP73，该方法不用于疾病诊断目的，其特征在于该方法能够对同一样品分离纯化的外泌体，分别采用荧光抗体标记外泌体膜蛋白和分子信标标记外泌体包含的靶基因mRNA进行同时检测，其中分子信标标记外泌体具体采用外泌体原位捕获孔板或芯片进行检测，所述的外泌体原位捕获孔板中每孔或芯片上含有荧光素标记的分子信标，所述的分子信标为检测靶基因mRNA的特异性DNA探针，标记外泌体膜蛋白的荧光抗体为荧光素标记的单克隆抗体；所述的特异性DNA探针的5’端茎和环与靶基因完全互补，3’端茎与5’端茎部分互补，5’端和3’端分别用FAM基团和BHQ1基团修饰，环上部分碱基用LNA基团修饰，所述的特异性DNA探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～13所示。

2.如权利要求1所述的一种同时检测靶基因的外泌体膜蛋白和mRNA的方法，其特征在于所述的特异性DNA探针由阳离子脂质复合纳米颗粒包裹。

3.针对靶基因编码的外泌体膜蛋白的荧光抗体和针对外泌体靶基因mRNA的特异性DNA探针在检测样品来源的外泌体且靶基因明确的非疾病诊断目的科学试验中的应用，所述靶基因为PDL1和GP73，所述的非疾病诊断目的科学试验目的是从活的细胞、动物、人体体液或排泄物样品中，检测来源于其的外泌体的所述靶基因的膜蛋白和mRNA；

所述的荧光抗体为荧光素标记的单克隆抗体，所述的特异性DNA探针的5’端茎和环与靶基因完全互补，3’端茎与5’端茎部分互补，5’端和3’端分别用FAM基团和BHQ1基团修饰，环上部分碱基用LNA基团修饰，所述的特异性DNA探针的核苷酸序列如SEQ ID NO.1～13所示。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述的样品选自：细胞培养上清，离体的实验动物血浆或血清，离体的人血浆、血清或尿液。