[发明专利]扩增游离DNA的试剂以及扩增方法

权利要求书

1.一种用于扩增样本中游离核酸的试剂,其中,该试剂包括：能够与样本里游离核酸的两端进行连接的接头序列，其中所述的接头序列为如下的序列之一:

5’-P-GAT CGG AAG AGC AGA CGT TTG ACC TCC GGT C dU A CAG TCG TAC CCT ATACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

5’-P-GAT CGG AAG AGCATA CGT ATG AGC TCC TGT C dU A CAT TCA TTC CCT ACACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

5’-P-GAT CGG AAG AGCATA CGT CTG ATC TCC AGT C dU A CAA TCC TTC CCT AGACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

其中dU为酶切位点。

2.根据权利要求1所述的试剂，酶为USER酶。

3.根据权利要求1所述的试剂，所述的试剂还包括引物序列，所述的引物序列包括能够与接头序列互补的序列。

4.根据权利要求3所述的试剂，所述的引物序列包括如下一对引物：GCT CTT CCG ATC、GAT CGG AAG AGC。

5.根据权利要求4所述的试剂，其中所述的引物序列选自如下的引物对所示的序列：SEQNO:2和SEQ NO:3；SEQ NO:8和SEQ NO:9；或者，SEQ NO:11和SEQ NO:12。

6.根据权利要求1所述的试剂，所述的试剂中还包括磁珠。

7.根据权利要求1所述的试剂，所述的样本为血液样本。

8.一种用于处理样本中游离核酸的试剂盒，所述的试剂盒里包括权利要求1-7之一所述的试剂。

9.一种扩增血液样本里游离DNA方法，该方法包括：

将接头序列连接到样本中的游离DNA的两端，让接头序列断开从而产生互补的单链，让与接头序列互补的一对引物进行游离DNA的扩增；所述的接头序列包括如下序列之一：

5’-P-GAT CGG AAG AGC AGA CGT TTG ACC TCC GGT C dU A CAG TCG TAC CCT ATACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

5’-P-GAT CGG AAG AGCATA CGT ATG AGC TCC TGT C dU A CAT TCA TTC CCT ACACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

5’-P-GAT CGG AAG AGCATA CGT CTG ATC TCC AGT C dU A CAA TCC TTC CCT AGACGA CGC TCT TCC GAT CT-3’；

其中dU为酶切位点，其中每一条序列下划线的序列为相互互补的序列。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，在用接头序列连接样本中的游离DNA前，从血液样本里分离出游离DNA。

11.根据权利要求9所述的方法，其中，所述的引物序列选自如下的引物对所示的序列：SEQ NO:2和SEQ NO:3；SEQ NO:8和SEQ NO:9；或者，SEQ NO:11和SEQ NO:12。

12.根据权利要求11所述的方法，其中，扩增完后，采用磁珠对扩增产物进行纯化和长度选择。