[发明专利]2-酮基-L-古龙酸的发酵用培养基及2-酮基-L-古龙酸的发酵生产方法有效
申请号: | 201811626312.8 | 申请日: | 2018-12-28 |
公开(公告)号: | CN109593813B | 公开(公告)日: | 2021-06-15 |
发明(设计)人: | 司振军;李乔平;胡柏剡;朱永强;李宏轩;俞柏金;陈召峰;于凯;吕国锋;黄国东 | 申请(专利权)人: | 黑龙江新和成生物科技有限公司;上虞新和成生物化工有限公司;浙江新和成股份有限公司 |
主分类号: | C12P39/00 | 分类号: | C12P39/00;C12P7/60;C12N1/20;C12N1/38;C12R1/11;C12R1/085;C12R1/125;C12R1/07;C12R1/01 |
代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
地址: | 152000 黑龙江省*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酮基 古龙酸 发酵 培养基 生产 方法 | ||
1.一种2-酮基-L-古龙酸的发酵生产方法,其中,所述方法包括将种子液接种至发酵培养基中进行发酵培养,从而产生2-酮基-L-古龙酸,所述发酵培养基中含有由细胞色素C和血红素组成的混合营养剂,
所述培养基pH为6.0~8.0,其以单位为g/L含有:L-山梨糖80~120,玉米浆4.0~6.0,尿素11.0~13.0,磷酸二氢钾0.5~1.5,无水硫酸镁0.1~0.2,碳酸钙4.0~6.0,所述混合营养剂0.007~0.009,
其中,所述混合营养剂的重量百分比组成为:25~67%的细胞色素C和33~75%的血红素,
对所述培养基115℃灭菌25min,其中所述山梨糖单独115℃灭菌25min,
当所述发酵培养基中的混合营养剂的浓度降至0.001~0.003g/L时,补充加入所述混合营养剂以维持所述发酵培养基中的混合营养剂浓度为0.001~0.003g/L,直至发酵结束,在所述发酵培养过程中,当在线溶氧值为20%~40%时,补充加入吡咯喹啉醌使其在培养基中的浓度为0.003~0.005g/L。
2.根据权利要求1所述的发酵生产方法,其中,所述混合营养剂在所述培养基中的含量为0.0075~0.0085g/L。
3.根据权利要求1所述的发酵生产方法,其中,通过流加的方式补充加入所述混合营养剂。
4.根据权利要求1所述的发酵生产方法,其中,当所述在线溶氧值为25%~35%时补充加入吡咯喹啉醌使其在培养基中的浓度为0.003~0.005g/L。
5.根据权利要求1或2所述的发酵生产方法,其中,所述发酵培养条件为:温度为24~34℃,pH为6.0~8.0,搅拌转速为200~650rpm,通气量为5~18L/min,罐压为0.02~0.08MPa,时间为40~60小时。
6.根据权利要求1或2所述的发酵生产方法,其中,所述方法还包括发酵结束后从所述发酵培养基中分离获得2-酮基-L-古龙酸。
7.根据权利要求1或2所述的发酵生产方法,其中,所述种子液为小菌和伴生菌的混合菌系,所述小菌为普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare),所述伴生菌选自由巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)组成的组。
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