[发明专利]负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒的制备方法及其产品和应用

说明书

本发明涉及一种负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒的制备方法及其产品和应用，将羧甲基壳聚糖溶解在去离子水中作为内水相；PLGA溶解在二氯甲烷中作为共聚物相；将内水相和共聚物相混合，细胞破碎仪冰浴超声乳化形成一级乳；碳酸氢铵水溶液或等体积去离子水加入到初乳中，超声乳化；在均质机的搅拌条件下形成复乳，除去二氯甲烷；离心进行冷冻干燥，得到干燥的羧甲基壳聚糖PLGA纳米颗粒。本发明采用多孔PLGA纳米颗粒，具有较大的药物负载量，效果更好。

技术领域

本发明涉及一种具有防喉管瘢痕生成的吸入式喷雾的制备方法，特别是涉及一种负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒的制备方法及其产品和应用。本发明属于医学生物学领域。

背景技术

喉气管瘢痕性狭窄是指喉或气管腔由于腔内瘢痕增生使气道变窄，而导致发声和（或）呼吸等功能障碍。各种原因引起的喉气管创伤或病变，导致软骨损伤、粘膜破裂或血肿形成，继之纤维结缔组织、瘢痕组织增生、修复，最终形成气管狭窄。原应包括外部创伤、喉气管手术和长期气管插管等，然而气管切开和气管插管是抢救呼吸功能障碍危害患者的重要措施，所以，其造成的喉气管狭窄已经成为耳鼻咽喉头颈外科医生面临的具有挑战性的难题。

喉气管损伤初期引起细胞变性、坏死，继而发生慢性炎性细胞浸润和纤维组织增生、修复，导致损伤处腔内粘膜层明显增厚、胶原沉积和软骨膜炎，最终形成组织重塑和气道瘢痕。

在本发明中，我们采用了多孔洞PLGA负载羧甲基壳聚糖作为吸入式药物，用于预防以及治疗喉气管插管、喉外科手术中形成的气管瘢痕性创伤。它不仅具有良好的药理性能，还与活体组织更加兼容。这种防瘢痕喷雾在医学领域有着较好的应用前景。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明目的在于提供一种负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒的制备方法。该方法制备的多孔洞PLGA负载羧甲基壳聚糖具有良好的药理性能与生物相容性，并具有良好的药物缓释性。

本发明的再一目的在于：提供一种上述方法制备的负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒产品。

本发明的又一目的在于：提供一种上述产品的应用。

本发明目的通过下述方案实现：一种负载羧甲基壳聚糖的多孔聚乳酸PLGA纳米颗粒的制备方法，具体如下：

将一定质量羧甲基壳聚糖溶解在150uL去离子水中，作为内水相（W1）；

150mg PLGA溶解在3.75mL二氯甲烷中，作为共聚物相（O）；

将内水相和共聚物相混合，使用细胞破碎仪冰浴超声乳化2min，形成W1/O一级乳（初乳）；0.75mL新配制的1.5%（w/v）碳酸氢铵（ABC）水溶液或等体积去离子水加入到W1/O初乳中，使用细胞破碎仪冰浴超声乳化30s；在搅拌的条件下，将混合物加入到25mL PVA水溶液中（1%，w/v），在均质机的搅拌条件下，搅拌1min形成复乳，倒入50mL去离子水中，在室温下搅拌过夜，除去二氯甲烷；次日4000rpm离心5min，收集羧甲基壳聚糖 PLGA纳米颗粒，去离子水洗3次，最后用过滤晒去除粒径过大的微球；进行冷冻干燥，得到干燥的羧甲基壳聚糖PLGA纳米颗粒。

PLGA为乳酸：乙醇酸=50：50(w/w)，羧酸端基，分子量：7400Da。

使用细胞破碎仪冰浴超声乳化2min为超声1s，间隔1s，功率50%，温度25℃。

使用细胞破碎仪冰浴超声乳化30s为超声1s，间隔1s，功率25%，温度25℃。

均质机形成复乳的搅拌速度为3000rpm（3/4 –inch head）。

加入的碳酸氢铵（ABC）的量占PLGA总量的7.5%（w/w）。