[发明专利]用于检测CPT2 F532C突变的引物、试剂盒及筛选重症EV71易感患儿的系统

说明书

本发明公开了一种用于检测CPT2 F532C突变的引物、试剂盒及筛选重症EV71易感患儿的系统，属于生物医学领域。该技术方案包括特异性上下游引物的设计，用于筛选重症EV71易感患儿的系统，包括模块1，模块1用于分析对待测者离体样本进行EV71 RNA检测得到的检测结果；模块2，模块2用于在所述模块1的分析结果为阳性时，进一步分析利用包含特异性引物的试剂盒对离体样本进行CPT2 F532C检测得到的检测结果；模块3，模块3用于在模块2的分析结果为阳性时，初步筛选待测者为或候选为重症EV71易感患儿。本发明及时而快捷地发现CPT2 F352C突变，进而确定重症EV71感染患儿，有助于在早期给予重症EV71感染患儿积极有效的预防治疗。

技术领域

本发明属于生物医学领域，尤其涉及用于检测CPT2 F532C突变的引物、试剂盒及筛选重症EV71易感患儿的系统。

背景技术

肠道病毒71型(enterovirus 71，EV71)属于肠道病毒A组的单股正链小RNA病毒，是引起儿童手足口病的最主要的病原体。EV71具有高度的嗜神经性，可引起脑膜炎、脑炎、脑干脑炎及神经源性肺水肿等严重中枢神经系统损害，重症病例病情进展迅速，病死率、致残率高，给国家、社会及家庭施以庞大的压力和负担，已然成为重要的公共卫生问题，引起全球各国的关注和警惕。

前期研究发现肉毒碱棕榈酰基转移酶2(carnitine palmitoyltransferase 2，CPT2)编码基因的第4外显子c.1055T>G/p.F352C(F352C)突变增加了罹患重症EV71感染的风险。细胞内CPT2表达以及酶活性的正常是线粒体进行β-氧化为机体各器官代谢提供能量的重要因素。CPT2 F352C突变后CPT2酶的功能缺陷，长链脂肪酸不能被有效转运并参与氧化磷酸化，ATP产生减少，外周血中的酰基肉碱浓度明显增高，从而导致一系列的能量及代谢紊乱。

CPT2 F352C突变的重症EV71脑炎患儿高热期CPT2活性和ATP水平明显低于恢复期，即CPT2 F352突变是EV71感染后脑损伤的重要风险因素，因其具有热不稳定性，感染并高热导致CPT2突变体酶活性降低、ATP降低，及其导致的细胞因子风暴、氧化应激等加重了宿主血脑屏障的损伤，血脑屏障内皮细胞的损伤，又能进一步刺激细胞因子的产生及炎性细胞的聚集，从而加重脑损伤。然而，目前临床上尚不能及时发现重症EV71感染患儿，以便采取有效的措施在早期给予积极的预防治疗。

发明内容

针对现有技术存在的不足之处，本发明所要解决的技术问题是及时而快捷地发现CPT2 F352C突变，进而确定重症EV71感染患儿，有助于在早期给予重症EV71感染患儿积极有效的预防治疗，提出用于检测CPT2 F532C突变的引物、试剂盒及筛选重症EV71易感患儿的系统。

为解决所述技术问题，本发明采用的技术方案为：

用于检测CPT2 F532C突变的特异性引物，根据CPT2 F532C设计特异性上下游引物，具体包括：

本发明还提供了包含如上述技术方案所述的用于检测CPT2 F532C突变的特异性引物的试剂盒。

本发明还提供了用于筛选重症EV71易感患儿的系统，包括下述数据处理模块：

模块1，所述模块1用于分析对待测者离体样本进行EV71 RNA检测得到的检测结果；

模块2，所述模块2用于在所述模块1的分析结果为阳性时，进一步分析利用如上述实施例所述的试剂盒对离体样本进行CPT2 F532C检测得到的检测结果；

模块3，所述模块3用于在所述模块2的分析结果为阳性时，初步筛选待测者为或候选为重症EV71易感患儿。

优选的，所述模块1包括：